[發明專利]一種秋刀魚抗氧化肽及其分離提取方法與應用

在審

• 申請號: 201410764890.3
• 申請日: 2014-12-11
• 公開（公告）號: CN104530187A
• 公開（公告）日: 2015-04-22
• 發明（設計）人: 趙強忠;趙謀明;蘇國萬;劉丹
• 申請（專利權）人: 華南理工大學
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C12P21/06;C07K1/20;A23L1/305
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 張燕玲

1.一種秋刀魚抗氧化肽，其特征在于所述抗氧化肽具有Ser-Gly-Ala-Ala-Met的氨基酸序列。

2.權利要求1所述的秋刀魚抗氧化肽的分離提取方法，其特征在于包括以下操作步驟：

(1)將秋刀魚去頭及內臟，血水清洗干凈后絞成魚糜，將魚糜與水按質量比為1：(2～4)混合，加入蛋白酶酶解4～12h，滅酶，冷卻后離心取上清液，得到秋刀魚蛋白酶解產物；

(2)用大孔吸附樹脂對PSPHs進行分離，依次用蒸餾水及體積分數為10％～29％、30％～49％、50％～69％和70％～90％的乙醇溶液梯度洗脫，收集30％～49％乙醇溶液洗脫的組分，冷凍干燥，得到肽粉I；

(3)將肽粉I用葡聚糖凝膠色譜柱分離，以蒸餾水為流動相進行洗脫，按洗脫的時間先后依次得到三個組分，收集最后洗脫的組分，冷凍干燥，得到肽粉II；

(4)將肽粉II溶于水后，用反相高效液相色譜柱進一步純化，依次用乙腈的體積百分比分別為2％～9％、10％～19％、20％～39％和40％～55％的乙腈-三氟乙酸水溶液為流動相進行洗脫，收集10％～19％的乙腈-三氟乙酸水溶液洗脫的組分，冷凍干燥，即得秋刀魚抗氧化肽。

3.根據權利要求2所述的秋刀魚抗氧化肽的分離提取方法，其特征在于：步驟(1)中所述的蛋白酶為風味蛋白酶或胰酶中的一種或兩種；蛋白酶的添加量為500～1500U/g蛋白。

4.根據權利要求2所述的秋刀魚抗氧化肽的分離提取方法，其特征在于：步驟(1)中所述酶解的pH為6.5～8.5，酶解溫度為45～55℃。

5.根據權利要求2所述的秋刀魚抗氧化肽的分離提取方法，其特征在于：步驟(1)中所述的滅酶是指在85～100℃下保溫10～30min；所述的離心是指在1500～4000g的離心力下離心10～30min。

6.根據權利要求2所述的秋刀魚抗氧化肽的分離提取方法，其特征在于：步驟(2)中所述的大孔吸附樹脂是指HP-20樹脂。

7.根據權利要求2所述的秋刀魚抗氧化肽的分離提取方法，其特征在于：步驟(3)中所述的葡聚糖凝膠色譜柱是指Sephadex?G-25葡聚糖凝膠色譜柱。

8.根據權利要求2所述的秋刀魚抗氧化肽的分離提取方法，其特征在于：步驟(4)中所述的反相高效液相色譜柱是指C18柱；所述的三氟乙酸水溶液是指體積分數為0.1％～0.2％的三氟乙酸水溶液。

9.權利要求1所述的秋刀魚抗氧化肽在食品、化妝品和醫藥領域中的應用。