[發明專利]一種功能植物乳桿菌及其復合菌粉的制備

在審

• 申請號: 201410763406.5
• 申請日: 2014-12-15
• 公開（公告）號: CN104560790A
• 公開（公告）日: 2015-04-29
• 發明（設計）人: 謝遠紅;張紅星;劉慧;于立娟;金君華;段慧霞;熊利霞;高秀芝
• 申請（專利權）人: 北京農學院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/14;A61P3/06;C12R1/25;C12R1/07;C12R1/645
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1.植物乳桿菌植物亞種(Lactobacillus?plantarum?subsp.plantarum)Zhang-LL?CGMCC?No.6936。

2.納豆芽孢桿菌(Bacillus?natto)BNZ3CGMCC?No.9146。

3.紫紅曲霉(Monascus?purpureus)Zhang-MP?CGMCC?No.9221。

4.一種功能植物乳桿菌及其復合菌粉的制備，其特征在于：(1)植物乳桿菌植物亞種菌粉的制備步驟：①菌種活化：將活化擴大培養后的植物乳桿菌植物亞種Zhang-LL菌種，接種到2L改良MRS培養基中，利用5L全自動發酵罐進行高密度發酵，溫度控制在34℃，發酵液pH?6.5，攪拌轉速為150r/min，發酵20～28h，得到發酵液；②收集菌泥：將發酵液置于離心機中，于4℃、8000r/min離心10min，收集得到菌泥；③預凍和冷凍干燥：將植物乳桿菌植物亞種Zhang-LL菌泥與1/10原發酵液體積的保護劑混合，凍干保護劑成分為15％脫脂乳粉，混合均勻后，得到濃縮發酵劑；將濃縮發酵劑于-35℃冰箱中預凍13h后，得到預凍活菌制劑，利用真空冷凍干燥機將預凍活菌制劑于-55℃、真空度0.08mBar的條件下，凍干48h至完全干燥狀態，獲得植物乳桿菌植物亞種凍干菌粉；(2)納豆芽孢桿菌納豆粉的制備步驟：①菌種活化與擴大培養：將納豆芽孢桿菌斜面菌種接入裝有20mL種子培養基的100mL三角瓶中，37℃、200r/min搖瓶振蕩培養24～36h；再取1mL種子液移入裝有50mL的發酵培養基的250mL三角瓶中，37℃、200r/min搖床培養24～36h，得到納豆芽孢桿菌擴大種子液。②發酵：將食用大豆粉碎至100目，按適當比例加水，于0.1Mpa滅菌60min，冷卻至40℃后，接種納豆芽孢桿菌擴大種子液，攪拌均勻后，于37℃發酵24h，得到納豆芽孢桿菌發酵物；③干燥：將納豆芽孢桿菌發酵物于55～65℃干燥后，過60目篩子，得到納豆芽孢桿菌納豆粉；(3)紫紅曲霉紅曲粉的制備步驟：①菌種活化與擴大培養：將紫紅曲霉斜面菌種接種到麥芽瓊脂培養基上，于30℃培養48h，4℃保存；挑取活化好的菌種接種到固體孢子培養基中，于30℃培養5d后，用生理鹽水洗下孢子，得到紫紅曲霉孢子液；②固態發酵：將孢子液以10000r/min離心20min，取孢子泥，加入到固態發酵培養基中，攪拌均勻，于32℃培養12～15d，得到紅曲米；③干燥與粉碎：將發酵完全的紅曲米于50℃干燥后，進行粉碎，過60目篩子，得到紫紅曲霉紅曲粉；(4)植物乳桿菌植物亞種菌粉與納豆芽孢桿菌納豆粉、紫紅曲霉紅曲粉制備復合菌粉方法：將上述所制備好的植物乳桿菌植物亞種菌粉與納豆芽孢桿菌納豆粉、紫紅曲霉紅曲粉按1∶1∶1(w/w)比例進行充分混合，成為具有降血清膽固醇功效的復合菌粉。