[發明專利]一種三葉青基因組DNA提取純化的方法在審
| 申請號： | 201410763362.6 | 申請日： | 2014-12-11 |
| 公開（公告）號： | CN104450681A | 公開（公告）日： | 2015-03-25 |
| 發明（設計）人： | 華金渭;朱波;吉慶勇;程文亮 | 申請（專利權）人： | 麗水市農業科學研究院 |
| 主分類號： | C12N15/10 | 分類號： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 湯東鳳 |
| 地址： | 323000 *** | 國省代碼： | 浙江;33 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 三葉青 基因組 dna 提取 純化 方法 | ||
1.一種三葉青基因組DNA提取純化的方法，其特征在于，包括如下步驟：將三葉青葉片純化后加入細胞核裂解緩沖液，于65℃水浴40min后采用萃取液進行萃取，取上清液，加入等體積的異丙醇沉淀，得到DNA沉淀物；依次用70％乙醇、75％乙醇洗滌DNA沉淀物，干燥，加入TE緩沖液，待DNA沉淀物溶解后加入RNA消化酶、于37℃水浴消化30min，得到三葉青基因組DNA。
2.根據權利要求1所述的三葉青基因組DNA提取純化的方法，其特征在于，所述的三葉青葉片為研磨成顆粒狀的三葉青葉片。
3.根據權利要求2所述的三葉青基因組DNA提取純化的方法，其特征在于，所述的三葉青葉片采用如下方法研磨成顆粒狀的三葉青葉片：剪取三葉青當年生新鮮葉片，去離子水清洗三遍，晾干后放入研缽中，加入pvp，液氮中研磨至顆粒狀的三葉青葉片。
4.根據權利要求1所述的三葉青基因組DNA提取純化的方法，其特征在于，所述的純化采用如下方法進行：將三葉青葉片置于盛有細胞核純化液的離心管中進行純化，離心，取沉淀，得到純化后的三葉青葉片。
5.根據權利要求4所述的三葉青基因組DNA提取純化的方法，其特征在于，所述的細胞核純化液由如下成分組成：100mM?Tris-HCl?pH?8.0、20mM?EDTA、0.25MNaCl以及2wt％?β-巰基乙醇。
6.根據權利要求1所述的三葉青基因組DNA提取純化的方法，其特征在于，所述的細胞核裂解緩沖液由如下成分組成：2wt％CTAB、2wt％PVP、100mM?Tris-HCl?pH8.0、25mM?EDTA及2.0M?NaCl。
7.根據權利要求1所述的三葉青基因組DNA提取純化的方法，其特征在于，所述的萃取液為體積比為24:1的氯仿-異戊醇。
8.根據權利要求1所述的三葉青基因組DNA提取純化的方法，其特征在于，所述的沉淀采用如下方法進行：-20℃冰箱放置30min。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于麗水市農業科學研究院，未經麗水市農業科學研究院許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201410763362.6/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
- 上一篇：多視圖視頻處理中的串擾降低
- 下一篇：硅磷酸鋁分子篩SAPO-34的合成方法
