[發明專利]一種羅漢果苷V的工業化制備方法

有效

• 申請號: 201410763087.8
• 申請日: 2014-12-12
• 公開（公告）號: CN104530168A
• 公開（公告）日: 2015-04-22
• 發明（設計）人: 黃曉;黃曦
• 申請（專利權）人: 黃曉;黃曦
• 主分類號: C07J17/00
• 分類號: C07J17/00
• 代理公司: 無
• 代理人: 無

技術領域

本發明涉及羅漢果果實有效成分的提取領域，尤其涉及一種羅漢果苷V的工業化提取制備技術。

背景技術

羅漢果[Siraitia?grosuenorii]為葫蘆科植物羅漢果的果實，是一種極具開發潛力的天然產物資源，羅漢果甜苷是羅漢果中主要有效成分，它是一種三萜烯葡萄糖苷，具有廣泛的生物特性。其中羅漢果苷V為羅漢果果實中含量和甜度均較高的成分，其含量約為1％，甜度相當于蔗糖的300倍，是主要的甜味成分。羅漢果甜苷具有安全，味質好，甜度高，熱穩定性好，顏色淺，受外界環境pH影響小(pH值介于2～10)等特性。我國于1996年7月正式批準該產品作為食品添加劑。

羅漢果工業生產通常采用結晶重結晶、層析或二者聯用方法。但無論哪種制備方法，其工藝都十分繁瑣，耗時極長，生產效率很低，且純度不高，無法獲得90％以上純度的產品。中國專利(申請號：201210167052.9，發明名稱：一種從羅漢果中提取羅漢果苷V和法尼醇的方法)描述了運用層析和結晶重結晶結合的方法提取羅漢果苷V的方法，過程步驟冗雜，且提取得到的產品純度不高。由于生產中大量使用易燃有機溶劑，如乙酸乙酯，石油醚、丙酮等作為結晶或層析溶劑，安全性差。

另有中國專利(申請號：200810073876.3)描述了一種采用兩步層析(分別使用無定型正相硅膠和C18反相硅膠)的方法分離提純羅漢果苷V。該方法相較于常規的結晶重結晶法在步驟簡化和產物純度方面已有一些提高，但所用溶劑如二氯甲烷，對環境和安全危害大，分離速度慢，且難以在線實時監測分離進程的缺點。

發明內容

針對傳統羅漢果苷V粗品精制過程中所存在的工藝繁瑣，純度不高等問題，本發明的目的旨在提供一種羅漢果苷V的工業化制備方法，簡化制備方法且具有在線分離的特性。

本發明的上述目的通過以下技術方案實現，一種羅漢果苷V的工業化制備方法，包括步驟：I、用水、有機溶劑或兩者的混合溶劑在加熱、微波或超聲任一種輔助作用下對羅漢果原料進行浸提，固液分離后得到羅漢果提取液，而后采用至少為噴霧、旋蒸的方法去除液體，獲得羅漢果苷V質量含量1％～20％的羅漢果苷粗品；II、用水將羅漢果苷粗品配置成溶液，過濾去除不溶物；III、將羅漢果苷溶液泵入動態軸向壓縮柱制備色譜系統，柱內填料為10μm～50μm的反相球形硅膠，上樣量與羅漢果苷粗品質量相對應，柱內流動相為質量濃度10％～90％且具有可調梯度的有機溶劑水溶液，先控制有機溶液水溶液的初始梯度為2∶8～4∶6，流速為100ml/min，洗脫30min～50min，而后調整有機溶液水溶液的梯度為1∶1～9∶1，繼續洗脫至50min～60min，調整紫外光度檢測器的檢測波長為203nm，自流動相開始流動起對動態軸向壓縮柱制備色譜系統進行液相色譜檢測，在線收集對應色譜峰的洗脫液，得到純度大于95％的羅漢果苷V。

進一步地，步驟I和步驟III中所述有機溶劑至少為甲醇、乙醇、乙腈、食品級乙醇。

進一步地，所述反相球形硅膠為粒徑10μm的正十八烷基反相硅膠粒。

進一步地，所述反相球形硅膠為粒徑22μm的正十八烷基反相硅膠粒。

進一步地，所述反相球形硅膠為粒徑50μm的正十八烷基反相硅膠粒。

進一步地，所述柱內流動相為乙醇與水，初始梯度為2∶8～3∶7。

進一步地，所述柱內流動相為乙腈與水，初始梯度為2∶8～3∶7。

進一步地，所述柱內流動相為甲醇與水，初始梯度為2∶8～4∶6。

本發明制備技術方案的實施，其較之于傳統制備工藝所具有的顯著優點為：直接采用粗提取后的羅漢果苷粗品來制備羅漢果苷V，無需大量復雜繁瑣的前處理和后處理過程，所用溶劑廉價、安全，且分離純化過程可在線實時監測，大大提高了安全性，節約了成本，適用于大規模工業化生產。高效液相色譜最終測定顯示，羅漢果苷V純度大于95％，總雜小于5％。

附圖說明

圖1是原始羅漢果苷粗品的高效液相色譜測定圖譜。

圖2是用填充了10μm正十八烷基反相硅膠填料(上樣量600mg)的動態軸向壓縮柱分離純化羅漢果苷V的高效液相色譜測定圖譜。

圖3是用填充了10μm正十八烷基反相硅膠填料(上樣量1g)的動態軸向壓縮柱分離純化羅漢果苷V的高效液相色譜測定圖譜。

圖4是用填充了10μm正十八烷基反相硅膠填料(上樣量3g)的動態軸向壓縮柱分離純化羅漢果苷V的高效液相色譜測定圖譜。