[發明專利]一種多重PCR鑒別分枝桿菌病原核酸的試劑盒有效
| 申請號： | 201410758583.4 | 申請日： | 2014-12-10 |
| 公開（公告）號： | CN104388575A | 公開（公告）日： | 2015-03-04 |
| 發明（設計）人： | 張泉;譚海明;蔡驍垚;張文成;范乃成;王建明 | 申請（專利權）人： | 揚州大學 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/32 |
| 代理公司： | 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 湯東鳳 |
| 地址： | 225009 *** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 多重 pcr 鑒別 分枝桿菌 病原 核酸 試劑盒 | ||
1.一種多重PCR鑒別分枝桿菌病原核酸的試劑盒，其特征在于包括引物組合物：16SrRNA-F：5'-acggtgggtactaggtgtgggtttc-3'、16Sr?RNA-R：5'-tctgcgattagcgactaagacttca-3'；RV3873-F：5'-gcgttgaccgagatggattat-3'、RV3873-R：5'-gctcatctcacccagttggc-3'；RV1506c-F：5'-ttccgaatcccttgtga-3'、RV1506c-R1：5'-ggagagcgccgttgta-3'、RV1506c-R2：5'-agtcgccgtggcttctctttta-3'。
2.根據權利要求1所述的一種多重PCR鑒別分枝桿菌病原核酸的試劑盒，其特征在于：所述的引物組合物針對分枝桿菌屬16sRNA保守區、結核分枝桿菌復合群RD1的RV3873基因和區分結核分支桿菌與牛結核分支桿菌的RV1506c基因進行同時擴增，生成特異性的擴增片段。
3.根據權利要求1所述的一種多重PCR鑒別分枝桿菌病原核酸的試劑盒，其特征在于：所述的多重PCR反應體系，以25μL計量具體配置為：16s?RNA-F：1μL，16s?RNA-R：1μL；RV1506c-F：1μL，RV1506c-R1：1μL，RV1506c-R2：1μL，Rv3873-F：1μL，Rv3873-R：1μL，10×Buffer：2.5μL；MgCl2：2μL；dNTP：4μL；DNA模板：0.5μL；rTaq：0.5μL；ddH2O：2.5μL。
4.根據權利要求3所述的一種多重PCR鑒別分枝桿菌病原核酸的試劑盒，其特征在于：所述的多重PCR反應程序為：預變性95℃，5min，再經95℃變性45s，57℃退火45s，72℃延伸50s，30個循環，72℃延伸10min。
5.根據權利要求1所述的一種多重PCR鑒別分枝桿菌病原核酸的試劑盒用于檢測和鑒別致病性和非致病性分枝桿菌病原的用途。
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