[發明專利]一種高嶺土固定化GY2B菌的制備方法及其應用

在審

• 申請號: 201410757077.3
• 申請日: 2014-12-10
• 公開（公告）號: CN104531666A
• 公開（公告）日: 2015-04-22
• 發明（設計）人: 吳平霄;李躍武;黨志;朱能武
• 申請（專利權）人: 華南理工大學
• 主分類號: C12N11/14
• 分類號: C12N11/14;C02F3/34;C02F101/34
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 張燕玲

1.一種高嶺土固定化GY2B菌的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)將GY2B菌活化培養形成菌體，將菌體在含苯酚的富集培養液中擴大培養得到濃菌液，再用無菌生理鹽水離心洗滌濃菌液得到菌體，之后將洗得的菌體懸于無菌生理鹽水中得到菌懸液；

(2)將滅菌處理后的高嶺土溶解于無菌MSM培養液中形成懸濁液，然后按接種量2～8％加入步驟(1)得到的菌懸液，吸附固定1～4小時，制得所述高嶺土固定化GY2B菌。

2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)所述GY2B菌活化培養的具體操作為：將平板儲存的GY2B菌落挑1～2環至含苯酚濃度50～200mg/L的無菌MSM培養液中震蕩培養，搖床條件為避光25～35℃、100～200r/min；8～16小時后取1～2mL菌液至新的含苯酚濃度50～200mg/L的無菌MSM培養液中接代培養，待8～16小時生長良好時再取1～2ml菌液至新的含苯酚濃度50～200mg/L的無菌MSM培養液中再次接代培養，按此重復接代培養2～5次即得到具有穩定降解苯酚能力的GY2B菌體，涂平板保存。

3.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)中將菌體在含苯酚濃度50～200mg/L的富集培養液中擴大培養8～16h得到所述濃菌液。

4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)中得到的菌懸液，于紫外分光光度計600nm處調節濃度，使其吸光度值為A＝0.8～1.5。

5.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)所述離心洗滌具體條件為：離心溫度為2～10℃，離心轉速為6000～12000r/min，離心時間為10～20分鐘，離心洗滌次數為2～5次。

6.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)所述高嶺土的滅菌處理具體操作為：將高嶺土于100～150℃下蒸汽滅菌15～60min，然后于80～150℃烘干分散10～30min。

7.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)所述高嶺土目數為100～300目；步驟(2)所述吸附固定具體條件為：在恒溫震蕩培養箱中進行，儀器參數為100～200r/min、25～35℃以及避光。

8.權利要求1至7中任一項所述制備方法獲得的高嶺土固定化GY2B菌。

9.權利要求8所述高嶺土固定化GY2B菌在處理含苯酚廢水中的應用。

10.根據權利要求9所述的應用，其特征在于，所述高嶺土固定化GY2B菌在處理含苯酚廢水時，高嶺土在體系中的濃度為15～30g/L；體系pH值為7～12，體系中苯酚濃度為0～300mg/L。