[發明專利]管角螺微衛星位點及其引物和應用

在審

• 申請號: 201410750857.5
• 申請日: 2014-12-09
• 公開（公告）號: CN104450915A
• 公開（公告）日: 2015-03-25
• 發明（設計）人: 潘英;吳雪萍;吳明燦;周于娜;蘇翔駒
• 申請（專利權）人: 廣西大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 廣西南寧公平專利事務所有限責任公司 45104
• 代理人: 楊立華

技術領域

本發明屬于分子生物學DNA標記技術領域，尤其涉及管角螺微衛星位點及其引物和應用。

背景技術

管角螺Hemifusus?tuba(Gmelin)屬軟體動物門(Mollusca)、腹足綱(Gastropoda)、新腹足目(Neogastropoda)、盔螺科(Galeodidae)，為暖水種，生活在熱帶、亞熱帶海區潮下帶淺海水深11-42m的軟泥和沙質的海底；貝殼較大型，狀似梨形，殼質堅厚，殼表被有黃褐色或淡棕色細密而短的茸毛殼皮；成體殼高110-200mm，殼寬70-117mm(約150-300g)，最大殼高超過300mm(體重>500g)；螺層約8.5層，每層的高、寬度增長較快，自螺旋部第三層開始到體螺層，每層的肩部有一環列結節突起，在體螺層則成為三角形的棘。管角螺主要分布于我國浙江以南、福建、廣東、廣西和海南沿海，貝殼大型可做號角，故俗稱“角螺”、“響螺”。其軟體部肥大，肉質細嫩，味道鮮美且營養豐富，具有極高的經濟價值。目前市場上出售的管角螺均采捕于自然海域，然而，由于近年來管角螺的過度采捕加上環境污染日益惡化等原因，海區管角螺自然資源遭受嚴重破壞。因此，保護其種質資源及進行種群遺傳多樣性評估已經成為我國海區管角螺自然資源可持續發展急待解決的重要課題之一。

隨著我國海水貝類養殖業迅猛發展，保護貝類的種質資源，是我國貝類養殖業健康持續發展的可靠保障，同時亦日益受到人們的重視。對某一種資源進行保護之前，需要了解有關該物種的遺傳背景和群體遺傳結構，從而建立種質資源的遺傳背景檔案。近年來，迅速發展的各種DNA分子標記技術，使人們從不同角度和不同層次，更加全面的揭示物種的遺傳信息，也為貝類的種質資源提供了重要的基礎資料。目前，國內外對管角螺的遺傳背景知之甚少，對其遺傳多樣性研究十分迫切。然而，選擇一種有效可靠，并且生物信息含量豐富的分子標記為管角螺的大規模人工繁育、養育提供基礎理論依據，為我國管角螺種質資源的開發、種群識別、增殖流放和合理保護提供資料，是一個急需解決的問題。

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供管角螺微衛星位點及其引物和應用，以便于對管角螺的繁育保護及科研研究。

為解決上述技術問題，本發明采用以下技術方案：

管角螺微衛星位點，具有序列表SEQ.ID.No.1至SEQ.ID.No.14中任一的堿基序列，它們分別標記編號為HT1、HT2、HT3、HT4、HT5、HT6、HT7、HT8、HT9、HT10、HT11、HT12、HT13、HT14。

管角螺微衛星位點的組合，包括管角螺微衛星位點HT1、HT2、HT3、HT4、HT5、HT6、HT7、HT8、HT9、HT10、HT11、HT12、HT13、HT14。

管角螺微衛星位點的引物，管角螺微衛星位點HT1、HT2、HT3、HT4、HT5、HT6、HT7、HT8、HT9、HT10、HT11、HT12、HT13、HT14的引物分別包括具有SEQ.ID.No.15/16、17/18、19/20、21/22、23/24、25/26、27/28、29/30、31/32、33/34、35/36、37/38、39/40、41/42中的一對堿基序列，它們分別標記編號為HT1p1/p2、HT2p1/p2、HT3p1/p2、HT4p1/p2、HT5p1/p2、HT6p1/p2、HT7p1/p2、HT8p1/p2、HT9p1/p2、HT10p1/p2、HT11p1/p2、HT12p1/p2、HT13p1/p2、HT14p1/p2。

管角螺微衛星位點的引物組合，包括引物HT1p1/p2、HT2p1/p2、HT3p1/p2、HT4p1/p2、HT5p1/p2、HT6p1/p2、HT7p1/p2、HT8p1/p2、HT9p1/p2、HT10p1/p2、HT11p1/p2、HT12p1/p2、HT13p1/p2、HT14p1/p2。

上述管角螺微衛星位點或其組合在管角螺的種群遺傳多樣性檢測、個體鑒定或分子輔助育種方面的應用。

權利要求3或4管角螺微衛星位點的引物或其組合在管角螺的種群遺傳多樣性檢測、個體鑒定或分子輔助育種方面的應用。

管角螺的種群遺傳多樣性檢測按以下步驟進行：

<1>基因組DNA的提取：采用CTAB(十六烷基三甲基溴化銨)抽提法提取管角螺基因組DNA；