[發(fā)明專利]管角螺微衛(wèi)星位點及其引物和應用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410750857.5
• 申請日: 2014-12-09
• 公開（公告）號: CN104450915A
• 公開（公告）日: 2015-03-25
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 潘英;吳雪萍;吳明燦;周于娜;蘇翔駒
• 申請（專利權(quán)）人: 廣西大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 廣西南寧公平專利事務所有限責任公司 45104
• 代理人: 楊立華

1.管角螺微衛(wèi)星位點，其特征在于具有序列表SEQ.ID.No.1至SEQ.ID.No.14中任一的堿基序列，它們分別標記編號為HT1、HT2、HT3、HT4、HT5、HT6、HT7、HT8、HT9、HT10、HT11、HT12、HT13、HT14。

2.權(quán)利要求1所述管角螺微衛(wèi)星位點的組合，其特征在于包括管角螺微衛(wèi)星位點HT1、HT2、HT3、HT4、HT5、HT6、HT7、HT8、HT9、HT10、HT11、HT12、HT13、HT14。

3.權(quán)利要求1所述管角螺微衛(wèi)星位點的引物，其特征在于：所述管角螺微衛(wèi)星位點HT1、HT2、HT3、HT4、HT5、HT6、HT7、HT8、HT9、HT10、HT11、HT12、HT13、HT14的引物分別包括具有SEQ.ID.No.15/16、17/18、19/20、21/22、23/24、25/26、27/28、29/30、31/32、33/34、35/36、37/38、39/40、41/42中的一對堿基序列，它們分別標記編號為HT1p1/p2、HT2p1/p2、HT3p1/p2、HT4p1/p2、HT5p1/p2、HT6p1/p2、HT7p1/p2、HT8p1/p2、HT9p1/p2、HT10p1/p2、HT11p1/p2、HT12p1/p2、HT13p1/p2、HT14p1/p2。

4.權(quán)利要求3所述管角螺微衛(wèi)星位點的引物組合，其特征在于包括引物HT1p1/p2、HT2p1/p2、HT3p1/p2、HT4p1/p2、HT5p1/p2、HT6p1/p2、HT7p1/p2、HT8p1/p2、HT9p1/p2、HT10p1/p2、HT11p1/p2、HT12p1/p2、HT13p1/p2、HT14p1/p2。

5.權(quán)利要求1或2所述管角螺微衛(wèi)星位點或其組合在管角螺的種群遺傳多樣性檢測、個體鑒定或分子輔助育種方面的應用。

6.權(quán)利要求3或4所述管角螺微衛(wèi)星位點的引物或其組合在管角螺的種群遺傳多樣性檢測、個體鑒定或分子輔助育種方面的應用。

7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的應用，其特征在于管角螺的種群遺傳多樣性檢測按以下步驟進行：

<1>基因組DNA的提取：采用CTAB抽提法提取管角螺基因組DNA；

<2>微衛(wèi)星PCR擴增：采用三引物檢測法檢測篩選管角螺微衛(wèi)星引物，并將篩選出的微衛(wèi)星引物擴增基因組DNA，獲得管角螺個體微衛(wèi)星擴增產(chǎn)物；

<3>擴增產(chǎn)物電泳：8％非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳，硝酸銀染色檢測擴增結(jié)果，掃描儀記錄電泳圖譜，根據(jù)電泳圖譜分析各微衛(wèi)星位點的擴增情況；

<4>遺傳多樣性分析：根據(jù)個體微衛(wèi)星擴增產(chǎn)物的分子量大小確定基因型，利用GENEPOP?Version?4.0計算遺傳多樣性參數(shù)；

<5>基因分型的結(jié)果分析，去除下列備選位點：無基因分型結(jié)果的位點；在任一個體中等位基因數(shù)在兩個以上的位點；在30個管角螺個體中等位基因在兩個以下的位點。