[發(fā)明專(zhuān)利]一種石上柏活性組分及其制備方法和用途

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410749905.9
• 申請(qǐng)日: 2014-12-10
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104546952A
• 公開(kāi)（公告）日: 2015-04-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 林新華;李少光;姚宏;黃建勇;黃麗英;李光文;陳艷;眭玉霞
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 福建醫(yī)科大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): A61K36/11
• 分類(lèi)號(hào): A61K36/11;A61P35/00
• 代理公司: 福州智理專(zhuān)利代理有限公司 35208
• 代理人: 王義星

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種中藥提取物,具體涉及一種石上柏活性組分制備方法及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

石上柏是卷柏屬（Selaginella）植物深綠卷柏(?Selaginella?doederleinii?Hieron)的干燥全草。它主產(chǎn)于福建、臺(tái)灣、廣東等地。全年均可采收，洗凈，鮮用或曬干入藥。具有清熱解毒，祛風(fēng)除濕，止血，抗癌等功效。其是中醫(yī)抗癌方中常用的抗癌藥物。現(xiàn)代藥理研究也發(fā)現(xiàn)石上柏或其組方能增強(qiáng)癌癥病人機(jī)體代謝和網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)功能，而同時(shí)未見(jiàn)有毒副作用的報(bào)道。

研究表明其主要成分為雙黃酮化合物：穗花杉雙黃酮（amentoflavone），橡膠樹(shù)雙黃酮（heveaflavone）、7,?4′,?7,?4'-四-0-甲基-穗花杉雙黃酮（7,?4′,?7,?4'-tetra-0-methyl-amentoflavone）、delicaflavone等。該黃酮類(lèi)成分為石上柏中的高效、低毒抗癌活性成分，是值得深入研究開(kāi)發(fā)的活性組分。?目前，對(duì)石上柏抗腫瘤活性化合物和組分尚無(wú)新藥開(kāi)發(fā)研究的報(bào)道，存在物質(zhì)基礎(chǔ)不明確，質(zhì)量不可控等弊端，缺乏制備高含量總黃酮活性組分的方法及專(zhuān)利報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種石上柏活性組分。

本發(fā)明的另一目的是提供一種上述石上柏活性組分的制備方法。

本發(fā)明的再一目的是提供一種含有以上石上柏活性組分的藥物或藥物組合物。

本發(fā)明還提供了含有該石上柏活性組分的制劑及該組分的用途。

本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的，所述的一種石上柏抗腫瘤活性組分的制備方法，其特征在于包括以下步驟：（1）脫脂：將自然晾干的石上柏粉碎后，用8~15倍量石油醚浸泡后回流，過(guò)濾，揮干有機(jī)溶劑得藥渣；（2）成分提取：將步驟（1）石上柏提取后的藥渣，用乙醇溶液冷凝回流提取，提取次數(shù)為至少1~3次或者提取次數(shù)為1-3次，每次提取時(shí)間為1~3小時(shí)，合并乙醇提取液濃縮成石上柏流浸膏；（3）柱層析：石上柏流浸膏用水復(fù)溶后上聚酰胺柱，采用水-乙醇溶液體系梯度洗脫；（4）組分類(lèi)別鑒定：步驟（3）的水-乙醇溶液體系梯度洗脫得到6個(gè)不同極性部位，經(jīng)過(guò)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)有2個(gè)組分含有黃酮類(lèi)化合物；（5）含量測(cè)定：測(cè)定步驟（3）獲得組分的黃酮類(lèi)化合物的含量。

所述步驟（2）中每次乙醇提取時(shí)、每次加乙醇水溶液量是藥渣的6-10倍量，優(yōu)選8-10倍量。

所述步驟（2）中，每次加入的乙醇溶液體積百分濃度60%-85%，或者濃度為60%-85wt%，優(yōu)選體積百分濃度60%-85%，或者優(yōu)選乙醇濃度為70%-85wt%。

所述步驟（3）中，水-乙醇溶液體積百分濃度梯度分別為0-10%、20-30%、40-50%、60-70%、80-90%和100%，優(yōu)選為10%、30%、50%、70%、90%和100%。

所述步驟（4）中得到的6個(gè)極性部位，分別為Fr.1，F(xiàn)r.2，F(xiàn)r.3，F(xiàn)r.4，F(xiàn)r.5和Fr.6，分別經(jīng)過(guò)體外活性篩選，得到組分Fr.4，F(xiàn)r.5或組分Fr.4和Fr.5的混合組分為石上柏抗腫瘤活性組分。

所述步驟（4）中得到的6個(gè)組分中Fr.4和Fr.5組分總黃酮含量占石上柏總黃酮含量的70-95%。

所述活性提取物是以石上柏脫脂后的藥渣作為起始原料提取的，提取液過(guò)濾濃縮，柱層析、乙醇水溶液梯度洗脫、分別濃縮，得6個(gè)極性部位，通過(guò)體外抗腫瘤活性驗(yàn)證和黃酮類(lèi)的含量測(cè)定，得到總黃酮含量占石上柏總黃酮含量70-95%的石上柏活性組分。

上述的制備方法制得的石上柏抗腫瘤活性組分的藥物和藥學(xué)上可接受的載體或和其它活性藥物及藥學(xué)上可接受的載體。

上述的藥物或藥物組合物制成任一種藥學(xué)上可接受的制劑。

上述的制備方法制得的藥物或藥物組合物在制備抗腫瘤物中的應(yīng)用。

具體地說(shuō)，本發(fā)明還可提供如下技術(shù)方案：

本發(fā)明的石上柏活性提取物中主要含有黃酮類(lèi)成分。其中，以重量百分比計(jì)，黃酮類(lèi)成分的含量為70%以上，優(yōu)選的，黃酮類(lèi)成分的含量為70%-95%。