[發明專利]一種安立生坦有關物質的檢測方法

有效

• 申請號: 201410748981.8
• 申請日: 2014-12-09
• 公開（公告）號: CN104359993A
• 公開（公告）日: 2015-02-18
• 發明（設計）人: 蕭偉;陳保來;李家春;黃文哲
• 申請（專利權）人: 江蘇康緣藥業股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 趙青朵

技術領域

本發明涉及分析化學領域，更具體的說是涉及一種安立生坦有關物質的檢測方法。

背景技術

安立生坦，英文名為Ambrisentan，適應癥為適用于治療有WHO?II級或III級癥狀的肺動脈高壓患者，用以改善運動能力和延緩臨床惡化。該藥物作為藥物使用時要求安立生坦的含量不低于98.5％，并對其中的有關物質含量做出了嚴格限制。

安立生坦目前已知的主要有關物質為SRS1、SRS2、SRS3、SRS4和DP1，來自于合成原料、拆分試劑、中間體以及降解產物，結構式如下：

鑒于當前對安立生坦產品的嚴格要求，在合成安立生坦后需要進行有關物質含量的檢測，以期達到標準要求。

文獻《Quality?Specification?for?Import?Drugs-Compound?Ambrisentan?tablets》(進口藥品質量標準——安立生坦片，[S].JX20090317.)中，安立生坦片進口藥品注冊標準采用乙腈-磷酸鹽緩沖鹽梯度洗脫，但在不進樣空運行梯度程序時有鬼峰出現，影響雜質的檢查。同時，其磷酸鹽緩沖鹽溶液pH值為6.5，安立生坦分子(pKa為4.0)以離子形式在反相色譜柱上進行分離，安立生坦色譜峰拖尾嚴重，不利于物質含量的檢測。雖然文獻(M.B.V.Narayana1,K.B.Chandrasekhar?and?B.M.Rao.A?Validated?Specific?Stability-Indicating?RP-HPLC?Assay?Method?for?Ambrisentan?and?Its?Related?Substances[J].Journal?of?Chromatographic?Science，2013，1-8)中的檢測方法將磷酸二氫鉀溶液pH值調至2.5，但在不進樣空運行梯度程序時仍有鬼峰出現，影響雜質的檢查。并且上述兩種檢測方法中采用的色譜條件，例如流動相和梯度洗脫方式等對雜質苯乙胺(DP1)均保留較弱，與溶劑峰未完全分開，同樣使檢測結果不準確?，F有的檢測方法，由于存在色譜條件和方法欠佳，使得其在系統適用性、重復性、線性范圍、定量限、檢測限等方面較差。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的在于提供一種安立生坦有關物質的檢測方法，使其在系統適用性、專屬性、重復性、線性范圍、定量限、檢測限等方面完全符合標準并具有較高的精密度。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：

一種安立生坦有關物質的檢測方法，包括：

取安立生坦待測品配制供試品溶液，將供試品溶液稀釋100倍作為對照品溶液，然后以三氟乙酸水溶液為流動相A、以三氟乙酸乙腈溶液為流動相B分別進行HPLC檢測，按照加校正因子的主成分自身對照法測得有關物質的含量。

針對現有檢測方法色譜條件不夠優化，致使影響對安立生坦有關物質SRS1、SRS2、SRS3、SRS4和DP1的檢測，本發明調整色譜條件，以加校正因子的主成分自身對照法為基礎，提供了一種在系統適用性、重復性、線性范圍、定量限、檢測限等方面完全符合標準的新檢測方法。本發明所述有關物質指的是SRS1、SRS2、SRS3、SRS4和DP1雜質。

作為優選，本發明所述檢測方法包括：

取安立生坦待測品配制供試品溶液，將供試品溶液稀釋100倍作為對照品溶液，然后以三氟乙酸水溶液為流動相A、以三氟乙酸乙腈溶液為流動相B分別進行HPLC檢測，按照加校正因子的主成分自身對照法計算公式：有關物質的含量＝F×(A_供/A_對)×1％，計算獲得有關物質的含量；

其中，F為有關物質的相對校正因子，A_供為供試品溶液有關物質的峰面積，A_對為對照溶液主峰峰面積，所述相對校正因子為主成分線性回歸方程的斜率和有關物質的線性回歸方程的斜率的比值。

所述相對校正因子是相對值，理論上不會變，但因實驗誤差的存在，會有微小變化，對最終的結果無影響。優選地，所述SRS1、SRS2、SRS3、SRS4和DP1的相對校正因子分別為8.0、1.6、1.2、1.0和0.64。

作為優選，所述HPLC檢測的洗脫程序為：