[發明專利]基于核酸內切酶特異性識別的細胞分選系統的應用

有效

• 申請號: 201410737627.5
• 申請日: 2014-12-05
• 公開（公告）號: CN104450617A
• 公開（公告）日: 2015-03-25
• 發明（設計）人: 藍田;J·蓋茨;鄭敦武
• 申請（專利權）人: 賽業（蘇州）生物科技有限公司
• 主分類號: C12N5/0784
• 分類號: C12N5/0784;C12N5/0783
• 代理公司: 上海卓陽知識產權代理事務所(普通合伙) 31262
• 代理人: 馬偉

1.基于核酸內切酶特異性識別的細胞分選系統在分選細胞中的應用，其特征在于，所述的分選系統包含以下組分：第一單鏈核苷酸、第二單鏈核苷酸、抗體、細胞分選介質、限制性內切酶；所述的第一單鏈核苷酸和第二單鏈核苷酸互補，且互補區域含有所述限制性內切酶的識別位點；所述的第一單鏈核苷酸、第二單鏈核苷酸、抗體、細胞分選介質均被修飾，修飾后的第一單鏈核苷酸可與修飾后的抗體相連接，修飾后的第二單鏈核苷酸可與修飾后的細胞分選介質相連接。

2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述的第一單鏈核苷酸和第二單鏈核苷酸為部分序列互補或完全互補。

3.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述的第一單鏈核苷酸或第二單鏈核苷酸的長度為6bp-1kb。

4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，所述的第一單鏈核苷酸或第二單鏈核苷酸的長度為18bp-50bp。

5.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述的細胞分選介質為磁珠、分離柱或聚陽離子納米顆粒。

6.根據權利要求5所述的應用，其特征在于，所述的第一單鏈核苷酸被巰基修飾，所述的第二單鏈核苷酸被生物素修飾，所述的抗體被順丁烯二酰亞胺修飾，所述的磁珠被鏈霉親和素修飾。

7.分選DC細胞、NK細胞和CIK細胞的試劑盒在分選DC細胞、NK細胞和CIK細胞中的應用，其特征在于，所述的試劑盒包含以下組分：巰基與生物素修飾的三對單鏈核苷酸，CD3、CD56和HLA-DR抗體，鏈霉親和素磁珠，限制性內切酶BamH?I、EcoR?I、Hind?III。

8.根據權利要求7所述的應用，其特征在于，所述的三對單鏈核苷酸的互補區域分別包含限制性內切酶BamH?I、EcoR?I、Hind?III的識別位點。

9.根據權利要求8所述的應用，其特征在于，所述的三對單鏈核苷酸的序列分別如SEQ?ID?NO.1-SEQ?ID?NO.6所示。