[發(fā)明專利]一種離子穩(wěn)定劑和懸浮穩(wěn)定劑配合使用的sOB-R乳膠增強(qiáng)免疫比濁檢測試劑盒

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410736436.7
• 申請日: 2014-12-05
• 公開（公告）號(hào): CN104360084A
• 公開（公告）日: 2015-02-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳勇泉
• 申請（專利權(quán)）人: 重慶中元生物技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/68
• 分類號(hào): G01N33/68;G01N33/531
• 代理公司: 上海光華專利事務(wù)所 31219
• 代理人: 張艷;李慧

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及體外診斷試劑領(lǐng)域，特別是涉及一種離子穩(wěn)定劑和懸浮穩(wěn)定劑配合使用的sOB-R乳膠增強(qiáng)免疫比濁檢測試劑盒。

背景技術(shù)

可溶性瘦素受體(soluble?leptin?receptor,sOB-R)是血液循環(huán)中最主要的瘦素結(jié)合蛋白。天然狀態(tài)下，人體血液中瘦素結(jié)合蛋白有兩種大小，分子量為140kD和110kD，經(jīng)糖苷酶脫糖基后，分子量為90kD和60kD，在人體，可溶性瘦素受體主要來自跨膜瘦素受體的脫落，它在調(diào)節(jié)瘦素信號(hào)功能中具有至關(guān)重要的作用。sOB-R只存在于正常人外周血循環(huán)中，腦脊液中尚未發(fā)現(xiàn)sOB-R。生理狀態(tài)下，sOB-R均具有明顯的晝夜節(jié)律，饑餓時(shí)，sOB-R水平升高。健康人體sOB-R與高密度脂蛋白(HDL)和脂聯(lián)素(adiponectin)水平呈正相關(guān)，與體重指數(shù)(BMI)、瘦素水平、空腹胰島素及胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)呈負(fù)相關(guān)。肥胖者體內(nèi)sOB-R水平降低，經(jīng)低熱卡飲食減肥后，sOB-R水平升高，在實(shí)施胃部分切除的減肥者中，sOB-R水平升高。在代謝綜合征患者中，sOB-R與胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)呈負(fù)相關(guān)，多囊卵巢綜合癥患者，sOB-R水平降低。臨床研究發(fā)現(xiàn)，嚴(yán)重腎病綜合征患者血液中，sOB-R水平升高，推測這一降低可能是瘦素抵抗的生化指征(marker)，是代謝綜合征的構(gòu)成成分之一。

越來越多的臨床研究也顯示，在不同的生理及病理情況下，如1型糖尿病、肥胖等患者中，血漿sOB-R的水平不同。因此，sOB-R可能通過增強(qiáng)或減弱瘦素的信號(hào)功能，從而在疾病的發(fā)生發(fā)展中起重要的調(diào)節(jié)作用。在近期的一項(xiàng)前瞻性研究中調(diào)查了916例18歲的健康青年男性，并在兩年后再次調(diào)查了其中91例受試者，發(fā)現(xiàn)sOB-R的水平與肥胖的所有基礎(chǔ)測量值和新陳代謝風(fēng)險(xiǎn)因子(血壓、總的低密度脂蛋白膽固醇、空腹血糖)成負(fù)相關(guān)，而與高密度脂蛋白膽固醇呈正相關(guān)性，這是目前為止第一個(gè)前瞻性的較大樣本的臨床研究，這些結(jié)果提示，sOB-R可能成為代謝綜合征和空腹血糖的預(yù)警指標(biāo)。研究還發(fā)現(xiàn)血漿sOB-R的水平與2型糖尿病的風(fēng)險(xiǎn)呈顯著負(fù)相關(guān)，通過校正了BMI、生活方式、飲食等因素后，發(fā)現(xiàn)血漿瘦素水平與2型糖尿病的風(fēng)險(xiǎn)沒有顯著關(guān)聯(lián)性，但sOB-R的水平與2型糖尿病的風(fēng)險(xiǎn)仍然呈顯著負(fù)相關(guān)。這種關(guān)聯(lián)性不依賴BMI、瘦素和脂聯(lián)素水平，提示sOB-R是2型糖尿病風(fēng)險(xiǎn)獨(dú)立的負(fù)性指標(biāo)。sOB-R檢測可廣泛用于內(nèi)分泌、消化科、感染科、腫瘤科、新生兒監(jiān)護(hù)室、器官移植科和治療實(shí)驗(yàn)室等。

對(duì)于sOB-R檢測，現(xiàn)有檢測方法主要有定量檢測方法，檢測方法有雙抗夾心法(ELISA)、放射免疫分析法(RIA)等，其中放射免疫分析法在臨床中有一定的限制，目前通常應(yīng)用ELISA方法檢測。盡管ELISA的靈敏度較高，但其操作復(fù)雜，需要較多時(shí)間，一般結(jié)果為定性或半定量，定量時(shí)偏差較大，且線性范圍窄，對(duì)于樣品稀釋度不好控制。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的上述不足，本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是：提供一種制備成本低廉，穩(wěn)定性好，易于保存，數(shù)據(jù)重復(fù)性好，檢測靈敏度高,可廣泛應(yīng)用于臨床生化儀的sOB-R檢測試劑盒。

為實(shí)現(xiàn)上述目的及其他相關(guān)目的，本發(fā)明第一方面提供一種離子穩(wěn)定劑和懸浮穩(wěn)定劑配合使用的sOB-R乳膠增強(qiáng)免疫比濁檢測試劑盒，其特征在于，包括試劑R1和試劑R2，所述試劑R1由緩沖液1、穩(wěn)定劑1、防腐劑1、EDTA、增凝劑和保護(hù)劑1組成；所述試劑R2由交聯(lián)sOB-R抗體的聚苯乙烯膠乳微球、緩沖液2、穩(wěn)定劑2、防腐劑2、保護(hù)劑2組成，其中聚苯乙烯膠乳微球與sOB-R抗體之間以共價(jià)交聯(lián)方式連接。

本技術(shù)方案中的防腐劑1和2是指可以抑制試劑中細(xì)菌和微生物污染的一類試劑，對(duì)試劑具有防腐殺菌的作用。試劑R2中的保護(hù)劑一類能夠保護(hù)膠乳顆粒表面的抗體的試劑。穩(wěn)定劑1和2可以保持試劑內(nèi)的電荷平衡。本技術(shù)方案中的sOB-R膠乳增強(qiáng)免疫比濁試劑盒，將sOB-R抗體交聯(lián)在聚苯乙烯膠乳微球表面，當(dāng)血液中的sOB-R與sOB-R抗體反應(yīng)時(shí)，帶動(dòng)聚苯乙烯膠乳微球聚集產(chǎn)生一定濁度，而濁度與血液中的sOB-R含量在一定范圍成正比，可以用全自動(dòng)生化儀在400-800nm波長下檢測血液中sOB-R的含量。