[發明專利]一種離子穩定劑和懸浮穩定劑配合使用的sOB-R乳膠增強免疫比濁檢測試劑盒

有效

• 申請號: 201410736436.7
• 申請日: 2014-12-05
• 公開（公告）號: CN104360084A
• 公開（公告）日: 2015-02-18
• 發明（設計）人: 吳勇泉
• 申請（專利權）人: 重慶中元生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/531
• 代理公司: 上海光華專利事務所 31219
• 代理人: 張艷;李慧

1.一種離子穩定劑和懸浮穩定劑配合使用的sOB-R乳膠增強免疫比濁檢測試劑盒，包括試劑R1和試劑R2，所述試劑R1由緩沖液1、穩定劑1、防腐劑1、EDTA、增凝劑和保護劑1組成；所述試劑R2由交聯sOB-R抗體的聚苯乙烯膠乳微球、緩沖液2、穩定劑2、防腐劑2、保護劑2組成，其中聚苯乙烯膠乳微球與sOB-R抗體之間以共價交聯方式連接，所述試劑R2中的穩定劑2采用離子穩定劑和懸浮穩定劑配合使用；其中離子穩定劑為NaCl、KCl、Na₂CO3、Na₂SO4或K₂SO4，懸浮穩定劑為PEG8000、蔗糖、甘油或葡萄糖。

2.如權利要求1所述的檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑R1中的緩沖液1選自Hepes緩沖液、Tris-HCl緩沖液、MOPS緩沖液、PBS緩沖液、甘氨酸緩沖液、硼砂緩沖液中的一種或多種的組合，其pH為7.0～9.0，濃度為25～500mmol/L；所述試劑R2中的緩沖液2選自PBS緩沖液、硼砂緩沖液、甘氨酸緩沖液、Hepes緩沖液、GOODS緩沖液、MOPS緩沖液中的一種或幾種，其pH為7.0～9.0，濃度為25～500mmol/L。

3.如權利要求1所述的檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑R1中的穩定劑1選自KCl、NaCl、CaCl中的一種或多種的組合，其質量濃度為0.5％～10％。

4.如權利要求1所述的檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑R1中的防腐劑1為疊氮鈉、硫柳汞或者ProClin300；所述試劑R2中的防腐劑2為疊氮鈉、硫柳汞或ProClin300。

5.如權利要求1所述的檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑R1中的增凝劑為PEG8000或者葡聚糖。

6.如權利要求1所述的檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑R2中的聚苯乙烯乳膠微球的表面官能團為氨基、羧基、酰肼、醛基或環氧基，聚苯乙烯乳膠微球的粒徑在100～600nm，所述聚苯乙烯乳膠微球為表面官能團為羧基的聚苯乙烯膠乳微球。

7.如權利要求1所述的檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑R2中的sOB-R抗體為鼠抗人sOB-R抗體、山羊抗人sOB-R?IgG抗體或兔抗人sOB-R?IgG抗體的一種或多種的組合。

8.如權利要求1所述的檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑R1中的保護劑1為牛血清白蛋白；所述試劑R2中的保護劑2為牛血清白蛋白。

9.如權利要求1所述的檢測試劑盒，其特征在于，所述EDTA濃度為10～100mmol/L。

10.如權利要求1-9任一權利要求所述的sOB-R乳膠增強免疫比濁檢測試劑盒的制備方法，包括如下步驟：

(1)試劑R1的制備：

在緩沖液1中加入穩定劑1、增凝劑、防腐劑1、保護劑1和EDTA，攪拌混合均勻，即得試劑R1；

(2)試劑R2的制備：

步驟一：將sOB-R抗體進行4℃透析，再用緩沖液將sOB-R抗體稀釋至2mg/ml，得到sOB-R抗體稀釋液；將聚苯乙烯膠乳微球用蒸餾水離心、洗滌3次；

步驟二：用緩沖液將經過步驟一洗滌后的聚苯乙烯膠乳微球稀釋到質量濃度為1％，再加入質量濃度為0.01％-0.1％的EDC，在室溫下攪拌反應30min，反應結束后15000rpm離心洗滌以除去未反應的EDC，然后加入步驟一得到的sOB-R抗體稀釋液，室溫下攪拌反應30min，再加入終止液終止反應，將得到的反應液15000rpm離心，用緩沖液2洗滌沉淀，重復離心洗滌3次，最后加入緩沖液2、防腐劑、穩定劑、保護劑攪拌混合均勻即得試劑R2。