[發明專利]一種油田化學劑的生物毒性評價方法

有效

• 申請號: 201410736313.3
• 申請日: 2014-12-05
• 公開（公告）號: CN105713952B
• 公開（公告）日: 2019-04-12
• 發明（設計）人: 張霖;姚新武;廖莎;樊亞超;師文靜
• 申請（專利權）人: 中國石油化工股份有限公司;中國石油化工股份有限公司撫順石油化工研究院
• 主分類號: C12Q1/02
• 分類號: C12Q1/02;C12R1/63;C12R1/01
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種油田化學劑的生物毒性評價方法，其特征在于包括如下內容：

（1）發光菌復蘇：將發光菌用氯化鈉溶液配制成菌懸液，于冰水浴中復蘇；所述的發光菌為弧菌屬、發光桿菌屬或異短桿菌屬；

（2）同步化培養：將復蘇菌懸液接種于活化培養基中，進行活化培養；活化培養后期，在菌體培養液中加入生長抑制劑，進行同步培養；經同步培養后，收集菌體細胞；所述的生長抑制劑為核酸合成抑制劑或者細胞分裂抑制劑；

（3）毒性評價：用氯化鈉溶液將菌體細胞配制成具有一定發光量的菌懸液，并添加發光促進劑，用于毒性評價分析；所述的發光促進劑為六碳糖或八碳以上的醛類。

2.按照權利要求1所述的方法，其特征在于：所采用的發光菌為明亮發光桿菌。

3.按照權利要求1或2所述的方法，其特征在于：所采用的發光菌來自于市售的發光菌凍干粉或者是斜面或液體保藏的菌種。

4.按照權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（1）中菌體復蘇過程使用質量濃度為1.5%～3.0%氯化鈉溶液，復蘇時間2min～10min。

5.按照權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（2）所述的活化培養基配方為胰蛋白胨0.1wt%～0.5wt%，酵母膏0.2wt%～0.5wt%，甘油0.1wt%～0.3wt%，磷酸二氫鉀0.05wt%～0.2wt%，磷酸氫二鈉0.05wt%～0.2wt%，氯化鈉0.2wt%～0.5wt%，pH6.5；活化培養時間為12h～18h。

6.按照權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（2）所述的生長抑制劑為5-氟脫氧尿嘧啶、羥基脲、阿糖胞苷、氨甲蝶呤、腺嘌呤、鳥嘌呤、胸腺嘧啶、秋水仙素、秋水仙胺中的一種或幾種。

7.按照權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（2）中發光菌在加入生長抑制劑菌體培養液中培養5h～16h后，進行離心處理，離心轉速為500rpm～1500rpm，離心時間10min～20min。

8.按照權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（2）中以質量濃度為2%～3%的氯化鈉溶液將收集的菌體細胞進行2～4次清洗。

9.按照權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（3）菌懸液中加入質量濃度為0.1%～0.3%發光促進劑。

10.按照權利要求1所述的方法，其特征在于：所述的發光促進劑為葡萄糖或辛醛。