[發(fā)明專利]磁性納米顆粒固定化氨基?；傅闹苽浼捌洚a(chǎn)品和應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410736026.2
• 申請(qǐng)日: 2014-12-04
• 公開（公告）號(hào): CN104480101A
• 公開（公告）日: 2015-04-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李平;馮駿晨;莫婷
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 同濟(jì)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N11/14
• 分類號(hào): C12N11/14;C12P41/00;C12P13/04
• 代理公司: 上?？剖⒅R(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31225
• 代理人: 葉敏華

1.一種磁性納米顆粒固定化氨基酰化酶的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)制備四氧化三鐵納米顆粒；

(2)將四氧化三鐵納米顆粒超聲分散后，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，與3-氨丙基三乙氧基硅烷反應(yīng)，制備氨基修飾的四氧化三鐵納米顆粒；

(3)將氨基修飾的四氧化三鐵納米顆粒與氨基酰化酶溶液混合反應(yīng)，得到磁性納米顆粒固定化氨基?；?。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種磁性納米顆粒固定化氨基?；傅闹苽浞椒ǎ涮卣髟谟?，步驟(2)中制備氨基修飾的四氧化三鐵納米顆粒的方法為：

將四氧化三鐵納米顆粒超聲分散到乙醇中，加入3-氨丙基三乙氧基硅烷，氮?dú)獗Ｗo(hù)，30-50℃機(jī)械攪拌18-36h，磁鐵收集氨基修飾的四氧化三鐵納米顆粒，然后用去離子水和無水乙醇洗滌，50-70℃真空干燥，密封保存?zhèn)溆谩?/p>

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種磁性納米顆粒固定化氨基?；傅闹苽浞椒?，其特征在于，四氧化三鐵納米顆粒與3-氨丙基三乙氧基硅烷的摩爾比為2∶1-4∶1。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種磁性納米顆粒固定化氨基?；傅闹苽浞椒?，其特征在于，步驟(3)中，制備磁性納米顆粒固定化氨基?；傅姆椒ㄈ缦拢?/p>

(1)將氨基修飾的四氧化三鐵納米顆粒溶于磷酸緩沖液，使其終濃度為2～8mg/ml，超聲后，加入戊二醛，使戊二醛體積分?jǐn)?shù)達(dá)到1.0％，25-40℃攪拌8-24h，磁鐵收集，用相同的磷酸緩沖液洗滌納米顆粒除去殘留的戊二醛，得到中間納米顆粒；

(2)將收集的中間納米顆粒與氨基?；溉芤夯旌?-2.5h，磁鐵收集后用相同的磷酸緩沖液洗滌以除去殘留的游離酶，得到磁性納米顆粒固定化氨基酰化酶。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種磁性納米顆粒固定化氨基?；傅闹苽浞椒?，其特征在于，所述的中間納米顆粒與氨基?；傅哪柋葹?∶1-3∶1。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種磁性納米顆粒固定化氨基酰化酶的制備方法，其特征在于，所述的磷酸緩沖液的濃度為0.1mol/L，pH為6.5-7.0。

7.一種由權(quán)利要求1所述的制備方法制得的磁性納米顆粒固定化氨基?；?。

8.一種如權(quán)利要求7所述的磁性納米顆粒固定化氨基?；傅膽?yīng)用，其特征在于，所述的磁性納米顆粒固定化氨基?；赣糜诓鸱植璋彼?。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種磁性納米顆粒固定化氨基酰化酶的應(yīng)用，其特征在于，所述的應(yīng)用包括以下步驟：

將茶氨酸加入到磷酸緩沖液的體系中42℃保溫5min，然后加入磁性納米顆粒固定化氨基酰化酶，振蕩反應(yīng)30min，立即沸水浴5min終止反應(yīng)。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的一種磁性納米顆粒固定化氨基酰化酶的應(yīng)用，其特征在于，所述的茶氨酸在磷酸緩沖液中的濃度為0.02mol/L，磁性納米顆粒固定化氨基?；概c茶氨酸的比為1.5U∶1μmol-3U∶1μmol，所述的磷酸緩沖液的濃度為0.1mol/L，pH為6.5-7.0。