[發(fā)明專利]一種將消旋體芳基鄰二醇轉化為手性芳基鄰二醇的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410735876.0
• 申請日: 2014-12-08
• 公開（公告）號: CN104561136B
• 公開（公告）日: 2018-07-06
• 發(fā)明（設計）人: 徐毅;陳穎;陳建波;許林菊;陳晨;邱靜雯;何麗;楊靖文;劉文旖;葉恩侃;方達通;韓微
• 申請（專利權）人: 上海應用技術學院
• 主分類號: C12P7/22
• 分類號: C12P7/22;C12R1/84
• 代理公司: 上海申匯專利代理有限公司 31001
• 代理人: 吳寶根;馬文峰

1.一種將消旋體芳基鄰二醇轉化為手性芳基鄰二醇的方法，其特征在于具體包括下列步驟：

（1）、利用氧化劑N-溴代丁二酰亞胺在添加β-環(huán)糊精的水相體系中將消旋體芳基鄰二醇氧化為對應的2-羥基芳基酮，氧化反應過程中控制溫度為60℃，時間為4-12h，氧化反應結束后將所得反應液加入堿性物質(zhì)調(diào)pH為7.0；

上述氧化劑N-溴代丁二酰亞胺、β-環(huán)糊精和消旋體芳基鄰二醇的用量，按摩爾比計算，N-溴代丁二酰亞胺:β-環(huán)糊精:芳基鄰二醇為1～2.5：1：1；

所述消旋體芳基鄰二醇為消旋體苯乙二醇、消旋體間氯苯乙二醇、消旋體鄰氯苯乙二醇、消旋體對溴苯乙二醇或消旋體對氯苯乙二醇；

（2）、畢赤酵母菌Pichia sp. SIT2014的培養(yǎng)，將收獲的畢赤酵母菌Pichia sp.SIT2014細胞置于步驟（1）中pH為中性的反應液中，控制溫度為30℃,180rpm的恒溫搖床下進行不對稱還原反應6-48h,所得的反應液控制轉速為12000r/min進行離心分離5min，得到的上清液用等體積的乙酸乙酯萃取三次后，萃取液用無水硫酸鈉干燥，然后用旋轉蒸發(fā)儀蒸干，即得手性芳基鄰二醇；

所述的畢赤酵母菌Pichiasp.SIT2014,其保藏編號為CGMCC NO.9300；

上述進行不對稱還原反應所用的畢赤酵母菌Pichiasp.SIT2014和pH為中性的反應液的量，按畢赤酵母菌Pichiasp.SIT2014細胞的干重：pH為中性的反應液的量為1g:100ml的比例計算。

2.如權利要求1所述的一種將消旋體芳基鄰二醇轉化為手性芳基鄰二醇的方法，其特征在于步驟（1）中堿性物質(zhì)為磷酸氫二鉀或氫氧化鉀。

3.如權利要求1所述的一種將消旋體芳基鄰二醇轉化為手性芳基鄰二醇的方法，其特征在于步驟（2）中所述的畢赤酵母菌Pichia sp. SIT2014的培養(yǎng)：

即首先取4℃冰箱保存的畢赤酵母Pichiasp.SIT2014 斜面菌種，挑取一環(huán)菌種接入到裝有15ml種子培養(yǎng)基的100ml搖瓶中，在搖床上控制溫度為30℃、轉速為180rpm進行種子培養(yǎng)18h，得到種子液；

然后按種子液：發(fā)酵培養(yǎng)基的體積比為5：100的比例，將上述所得的種子液接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中，然后在搖床上控制溫度為30℃、轉速為180rpm進行發(fā)酵培養(yǎng)24h，得到的發(fā)酵液控制轉速為10000r/min進行離心10min，收獲的細胞即為畢赤酵母Pichia sp.SIT2014細胞；

所述的畢赤酵母菌Pichiasp.SIT2014,其保藏編號為CGMCC NO.9300；

所述的種子培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基組分相同，按每升計算，含葡萄糖15.0g，胰蛋白胨5.0g，酵母粉5.0g，KH₂PO₄ 0.5g,K₂HPO₄ 0.5g，MgSO₄·7H₂O 0.5g，余量為水。