[發(fā)明專利]黃皮中一種新的咔唑生物堿、其制備方法與用途

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410731918.3
• 申請(qǐng)日: 2014-12-06
• 公開（公告）號(hào): CN104387400A
• 公開（公告）日: 2015-03-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周同永
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 西寧意格知識(shí)產(chǎn)權(quán)咨詢服務(wù)有限公司
• 主分類號(hào): C07D491/153
• 分類號(hào): C07D491/153;A61P31/04
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技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及天然藥物領(lǐng)域，具體涉及黃皮中一種新的咔唑生物堿，及該化合物的制備方法與醫(yī)藥用途。

背景技術(shù)

蕓香科（Rutaceae）黃皮屬（Clausena）植物具有廣泛的藥理活性，國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)此進(jìn)行了深入的研究。本屬植物全世界約有30種，分布于熱帶、亞熱帶地區(qū)；我國(guó)有近10種，分布于長(zhǎng)江以南各省，以云南南部、廣東、廣西、海南及臺(tái)灣等省分布較為集中，資源豐富。該屬植物在我國(guó)自古即為藥用，古代及現(xiàn)代的中草藥書籍中多有收載，民間應(yīng)用更為廣泛。藥理研究表明，它們具有保肝、降脂、解痙、抑菌及抗癌等生物活性。有關(guān)其化學(xué)成分的研究報(bào)道很多，主要化學(xué)成分為揮發(fā)油、香豆素類和生物堿類化合物。其中，與本發(fā)明有關(guān)的咔唑生物堿就是其中一類生物堿類化合物。該屬中代表性咔唑生物堿化合物結(jié)構(gòu)式如下：

黃皮Clausena?lansium?(Lour.)?Skeels是蕓香科黃皮屬植物，別名黃彈、黃皮子、黃彈子、黃檀子等。黃皮是原產(chǎn)于我國(guó)熱帶以及亞熱帶地區(qū)的一種特產(chǎn)果樹，在我國(guó)至少已有1500年的栽培歷史。國(guó)內(nèi)主要分布于廣東、廣西、福建、臺(tái)灣、云南、海南等地。黃皮具有很高的藥用價(jià)值，黃皮的果、葉、根、種子均能入藥。黃皮的果實(shí)有行氣、消食、化痰之功效，主治食積脹滿，脘腹疼痛，?疝痛，痰飲，咳喘。根、葉及種子也可治腹痛、胃痛、感冒發(fā)熱等癥。20世紀(jì)80年代，從黃皮葉中分離得到黃皮酰胺類化合物，發(fā)現(xiàn)該類化合物具有較強(qiáng)的藥理活性。此后，對(duì)黃皮活性成分的分離以及藥理作用的研究在醫(yī)藥界得到廣泛的關(guān)注。?

隨著腫瘤發(fā)病機(jī)制的不斷闡明和抗腫瘤作用靶點(diǎn)的不斷發(fā)現(xiàn)，多靶點(diǎn)抑制腫瘤信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)成為腫瘤藥物開發(fā)的重要方向。相對(duì)于單靶點(diǎn)藥物和多種單靶點(diǎn)藥物聯(lián)用來(lái)說(shuō)，多靶點(diǎn)藥物具有更多優(yōu)越性：可避免產(chǎn)生藥物相互作用，減少不良反應(yīng)，治療作用全面等。在各種分子靶點(diǎn)中，蛋白酷氨酸激酶(?protein?tyrosine?kinase，PTK)?是目前效果明顯且前景廣闊的抗腫瘤藥物靶點(diǎn)之一。PTK是一組催化蛋白質(zhì)酪氨酸殘基磷酸化的酶系，其在細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中起著十分重要的作用，也與腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖、分化和凋亡密切相關(guān)，通過(guò)抑制PTK?可破壞腫瘤細(xì)胞的信號(hào)傳遞，抑制腫瘤細(xì)胞增殖，從而達(dá)到抗腫瘤的目的。目前已經(jīng)有多種結(jié)構(gòu)的酪氨酸激酶抑制劑類抗腫瘤藥物上市或進(jìn)入臨床研究，并取得了良好的治療效果，如伊馬替尼等替尼類藥物。

發(fā)明人在對(duì)黃皮化學(xué)成分研究中，采用硅膠柱色譜法從正丁醇萃取物中分離鑒定了一個(gè)新的咔唑生物堿類化合物，該化合物為首次報(bào)道。多種體外活性篩選表明：該化合物具有顯著的抗菌作用和與陽(yáng)性藥相當(dāng)?shù)囊种频鞍桌野彼峒っ傅淖饔茫梢赃M(jìn)一步開發(fā)用來(lái)制備抗菌藥物和以蛋白酪氨酸激酶為靶標(biāo)的藥物。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種從黃皮中分離得到的一種新的咔唑生物堿類化合物Ⅰ。

本發(fā)明的另一目的是提供一種從黃皮中分離純化化合物Ⅰ的制備方法。

本發(fā)明的再一目的在于提供化合物Ⅰ在制備抗菌藥物和以蛋白酪氨酸激酶為靶標(biāo)的藥物的應(yīng)用。

根據(jù)本發(fā)明的一方面，提供具有下列化學(xué)結(jié)構(gòu)式Ⅰ的化合物：

根據(jù)本發(fā)明的另一目的是提供一種從黃皮中分離純化化合物Ⅰ的制備方法，其制備步驟包括：

A.?將黃皮葉或根用醇或醇溶液提取一次或多次，過(guò)濾，收集濾液，再減壓濃縮干燥，獲得醇提取物；

B.?將醇提取物加水制成混懸液，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃取，正丁醇萃取液減壓濃縮，得正丁醇部位浸膏；

C.?將正丁醇部位浸膏進(jìn)行柱色譜分離純化，得到純的化合物Ⅰ。

步驟C詳細(xì)包括：①將正丁醇浸膏用硅膠柱層析分段，二氯甲烷-甲醇梯度洗脫（20:1,?10:1,?5:1,?1:1），收集二氯甲烷-甲醇（體積比10:1）洗脫物；②取二氯甲烷-甲醇（體積比10:1）洗脫物進(jìn)行MCI柱層析去除色素，用水-甲醇梯度洗脫（體積比70:30,?50:50,?30:70），收集水-甲醇（體積比30:70）洗脫物；③取水-甲醇（體積比30:70）洗脫物進(jìn)行硅膠柱層析，用二氯甲烷-甲醇梯度洗脫（體積比15:1,?12:1,?10:1），收集二氯甲烷-甲醇（體積比12:1）洗脫物濃縮；④取二氯甲烷-甲醇（體積比12:1）洗脫物用制備型高效液相色譜分離，水-甲醇梯度洗脫，從水-甲醇（體積比35:65）洗脫部位得到純的化合物Ⅰ。