[發明專利]應用液質-質聯用儀測定淡水池塘底泥中氯霉素的方法

有效

• 申請號: 201410719313.2
• 申請日: 2014-12-01
• 公開（公告）號: CN104407085A
• 公開（公告）日: 2015-03-11
• 發明（設計）人: 張素青;陳永平;李春青;葉紅梅;高麗娜;李連慶;時文博;王秀芹;王德興;王寶峰;馬丹;王娟娟;易偉;李兆千;張玲
• 申請（專利權）人: 農業部漁業環境及水產品質量監督檢驗測試中心（天津）
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 天津盛理知識產權代理有限公司 12209
• 代理人: 韓奎勇

1.一種應用液質-質聯用儀測定淡水池塘底泥中氯霉素的方法，其特征在于包括步驟如下：

(1)養殖池塘底泥樣品采集，用采泥器取表層沉積物，放在廣口瓶中在-18℃冰箱保存；

(2)樣品的提取，稱取樣品5.00g置50ml離心管中，加入2ml水潤濕，加入500μl濃度為10.0ng/ml的氯霉素內標溶液、5ml乙腈及4％氯化鈉溶液5ml，漩渦振蕩2min，超聲萃取20min后，靜置10min，用轉速為15000r/min的離心機離心10min，提取上清液至于另一50ml離心管中；

(3)重復上述步驟(2)的提取過程，合并兩次提取液，在合并的提取液中加入正己烷5ml，漩渦振蕩2min，用轉速為5000r/min的離心機離心10min，棄去正己烷層溶液，重復一次，得提取液；

(4)在上述(3)步所得提取液中加入水飽和乙酸乙酯溶液5ml，漩渦振蕩2min，用轉速為5000r/min的離心機離心10min，上層液轉移到15ml離心管中，重復提取1次，將兩次所得上層液合并；

(5)將上述(4)步所得提取液用氮氣吹干，用乙腈－水(5+95)溶液3ml溶解氮氣吹干后殘留物得備用液；

(6)將固相萃取柱依次用甲醇10ml，水10ml預洗，然后取上述備用液過柱，用水5ml洗柱，用5ml甲醇水(50+50)溶液洗脫，以1ml/min的速度將樣品洗脫入15ml離心管中；

(7)將上述洗脫液中加入水飽和乙酸乙酯溶液5ml，渦旋振蕩2min，5000r/min，離心5min，取上層液，重復提取1次，合并提取液氮氣吹干，得吹干殘留物；

(8)用1mL甲醇水(50+50)溶液溶解上步殘留物，旋渦后經0.22μm微孔濾膜過濾后用液質-質聯用儀上機測定。

2.根據權利要求1所述的應用液質-質聯用儀測定淡水池塘底泥中氯霉素的方法，其特征在于所述步驟(8)中用液質-質聯用儀上機測定時，檢測中各項條件設定為：

①色譜柱:Shim-Pack?XR-ODS?C₈色譜柱，5μm，75mm×2.0mm(內徑)，柱溫40℃，流動相為A-水，B-甲醇，流速為0.30mL/min，進樣量5μL；

②梯度洗脫條件如表1：

表1?梯度洗脫條件

③其他各項設定：離子源：電噴霧離子源；掃描方式：負離子掃描；檢測方式：多反應監測(MRM)；電噴霧電壓：-4500V；氣簾氣：20PSI；輔助氣：50PSI；去簇電壓：-80V及碰撞電壓：-10V，離子源溫度:500℃；

④化合物的多反應監測離子對及質譜相關參數如表2所示；

表2化合物的多反應監測離子對及質譜相關參數

其中*為定量離子；

⑤梯度標準品溶液及內標質量的確定；采用不含目標待測物的基質空白溶液配制梯度標準品溶液(0，0.5，1.0，2.0，4.0，8.0，10.0ng/mL)加入氯霉素-D5內標質量為5.0ng；

⑥確定檢測限為0.1μg/kg，定量限為0.3μg/kg；儀器檢出限及方法定量限見表3,

表3?線性范圍、標準曲線方程、檢出限和定量限