[發(fā)明專利]一種食品中小分子化合物膠體金檢測(cè)試紙條的評(píng)價(jià)方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410717387.2
• 申請(qǐng)日: 2014-12-01
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104483474A
• 公開(kāi)（公告）日: 2015-04-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鄒明強(qiáng);王燕飛;薛強(qiáng);劉彩虹;馬吉湘
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院
• 主分類(lèi)號(hào): G01N33/53
• 分類(lèi)號(hào): G01N33/53
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種膠體金檢測(cè)試紙條的評(píng)價(jià)技術(shù)，尤其涉及一種食品中農(nóng)獸藥殘留、添加劑等小分子化合物膠體金試紙條質(zhì)量評(píng)價(jià)方法。

背景技術(shù)

試劑盒是能完成一個(gè)特定實(shí)驗(yàn)的必需的試劑/器材的集合，是應(yīng)用最為廣泛的快速檢測(cè)關(guān)鍵材料，隨著國(guó)內(nèi)、國(guó)際社會(huì)對(duì)食品安全的重視，相關(guān)的檢測(cè)技術(shù)也得到了迅猛發(fā)展。商品化試劑盒以其方便快捷、對(duì)環(huán)境設(shè)備及檢測(cè)人員要求低、檢測(cè)速度快、樣品處理相對(duì)簡(jiǎn)單、價(jià)格低和適于開(kāi)發(fā)成攜帶方便等特點(diǎn)，特別適于現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)控、大量樣本篩查和基層實(shí)驗(yàn)室使用，是食品安全檢測(cè)領(lǐng)域中具有發(fā)展前景和產(chǎn)業(yè)化的檢測(cè)方法之一，在食品檢測(cè)中涵蓋了農(nóng)殘、獸殘、添加劑、重金屬、生物毒素、過(guò)敏源、微生物、轉(zhuǎn)基因等幾乎所有領(lǐng)域。

目前用于食品檢測(cè)領(lǐng)域的商品化試劑盒從用途上區(qū)分，主要包括有用于化學(xué)類(lèi)物質(zhì)檢測(cè)的試劑盒與用于生物類(lèi)物質(zhì)檢測(cè)的試劑盒。前者主要如甲醛快速檢測(cè)試劑盒、二氧化硫快速檢測(cè)試劑盒以及如阿維菌素檢測(cè)試劑盒、組胺檢測(cè)試劑盒等，在包括農(nóng)藥、獸藥、過(guò)敏源、生物毒素、食品添加劑等檢測(cè)領(lǐng)域越來(lái)越多地被使用；后者如微生物及病毒檢測(cè)試劑盒、大腸桿菌0157快速檢測(cè)試劑盒、金葡SEB腸毒素快速檢測(cè)試劑盒、霍亂弧菌快速檢測(cè)試劑盒等，用于轉(zhuǎn)基因檢測(cè)的如玉米轉(zhuǎn)基因檢測(cè)試劑盒等，發(fā)展前景廣闊。

從試劑盒種類(lèi)上來(lái)分，膠體金快速檢測(cè)試紙條是一種結(jié)合免疫技術(shù)和色譜層析技術(shù)的檢測(cè)方法，主要原理是將特異性的抗原或抗體以條帶狀包在NC膜的檢測(cè)線上，膠體金標(biāo)記的抗原或著抗體吸附在結(jié)合墊上，當(dāng)待測(cè)樣品加到試紙條一端的加樣孔上后，通過(guò)毛細(xì)作用向前移動(dòng)，溶解結(jié)合墊上的膠體金標(biāo)記的抗原或抗體，在移動(dòng)至包被的抗原或抗體的檢測(cè)線處，如果樣品中航油相應(yīng)的抗原或抗體，包被在檢測(cè)線上的抗原或抗體和膠體金標(biāo)記物與樣品中的對(duì)應(yīng)抗體或抗原結(jié)合，形成免疫復(fù)合物，膠體金府記載檢測(cè)線處形成一條可見(jiàn)的紫紅色條帶。它不需要加樣、洗滌的步驟，5-10分鐘便可得到直觀實(shí)驗(yàn)結(jié)果，無(wú)需儀器，非常適用于食品的現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)。

但鑒于包括膠體金快速檢測(cè)試紙條在內(nèi)的商品化試劑盒質(zhì)量良莠不齊、評(píng)價(jià)技術(shù)缺失、監(jiān)管疏漏都阻礙了試劑盒產(chǎn)業(yè)的發(fā)展和試劑盒評(píng)價(jià)技術(shù)的應(yīng)用。試劑盒的使用者、生產(chǎn)者、監(jiān)管者對(duì)評(píng)價(jià)技術(shù)都有急迫需求。

目前國(guó)內(nèi)外對(duì)可供借鑒的成熟的評(píng)價(jià)制度方案不多，而試劑盒本身的性質(zhì)也使其不能直接照搬其他產(chǎn)品的評(píng)價(jià)方案和技術(shù)，同時(shí)，各種復(fù)雜的食品基質(zhì)會(huì)引起諸多干擾因素，因此如何準(zhǔn)確評(píng)價(jià)食品中小分子化合物膠體金檢測(cè)試紙條的評(píng)價(jià)有較大的技術(shù)難度。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種食品中農(nóng)獸藥殘留、添加劑等小分子化合物膠體金檢測(cè)試紙條的評(píng)價(jià)方法，以對(duì)待評(píng)價(jià)的商品化膠體金試紙條作出更為準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)。

本發(fā)明的評(píng)價(jià)方法，其特征在于包括：通過(guò)結(jié)合室內(nèi)驗(yàn)證與室間協(xié)同實(shí)驗(yàn)兩個(gè)評(píng)價(jià)單元，根據(jù)待評(píng)價(jià)試劑盒說(shuō)明書(shū)提取特征參數(shù)設(shè)計(jì)評(píng)價(jià)指標(biāo)，構(gòu)架評(píng)價(jià)單元內(nèi)各評(píng)價(jià)指標(biāo)的計(jì)算模型，對(duì)食品中小分子化合物的商品化膠體金檢測(cè)試紙條進(jìn)行較為準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)。

實(shí)驗(yàn)室內(nèi)測(cè)試實(shí)驗(yàn)，包括：

靈敏度驗(yàn)證，以檢出陽(yáng)性結(jié)果次數(shù)占所有測(cè)試結(jié)果的比例進(jìn)行測(cè)定；

交叉反應(yīng)驗(yàn)證，用于評(píng)價(jià)同類(lèi)藥物的交叉反應(yīng)以及不同基體的交叉反應(yīng)；

準(zhǔn)確度試驗(yàn)，用于評(píng)價(jià)對(duì)于不同食品基質(zhì)，待評(píng)價(jià)試劑盒檢測(cè)限的相對(duì)準(zhǔn)確度；

耐變性試驗(yàn)，包括確定測(cè)試樣品和數(shù)量，選擇需要評(píng)價(jià)的耐變因素。用于評(píng)價(jià)可能影響檢測(cè)結(jié)果的因素；

批間變異與穩(wěn)定性，用于評(píng)價(jià)待評(píng)價(jià)試劑盒的產(chǎn)品穩(wěn)定性。

實(shí)驗(yàn)室間協(xié)同實(shí)驗(yàn)，包括：

準(zhǔn)確度驗(yàn)證，用于評(píng)價(jià)在不同實(shí)驗(yàn)室、不同操作人員情況下，待評(píng)價(jià)試劑盒的準(zhǔn)確度。

采用該評(píng)價(jià)方法，能夠?qū)Υu(píng)價(jià)的商品化膠體金檢測(cè)試紙條作出較為準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明的評(píng)價(jià)步驟如下：

(一)室內(nèi)驗(yàn)證單元

1、靈敏度驗(yàn)證

用試劑盒提供的樣品稀釋液分別配制包括0μg/L在內(nèi)的6個(gè)濃度水平的標(biāo)準(zhǔn)溶液，每個(gè)濃度水平分3天、每天2平行共檢測(cè)6平行，以響應(yīng)信號(hào)對(duì)濃度作圖，列出回歸方程，并進(jìn)行回歸分析。

配制標(biāo)準(zhǔn)溶液(購(gòu)置的標(biāo)準(zhǔn)品)添加到經(jīng)確證的空白樣品(目標(biāo)物含量＜0.01μg/L)中，添加3個(gè)水平濃度；對(duì)照組為經(jīng)確證的空白樣品。采用目測(cè)方法進(jìn)行測(cè)試，對(duì)照組作5次平行測(cè)試，其他添加水平做20次平行測(cè)試，記錄每次測(cè)試結(jié)果。