[發明專利]一種同時測定熱毒寧注射液中11種有效成分含量的方法

有效

• 申請號: 201410717303.5
• 申請日: 2014-11-29
• 公開（公告）號: CN104407072A
• 公開（公告）日: 2015-03-11
• 發明（設計）人: 蕭偉;畢宇安;吳建雄;王振中;吳莎;吳亞男;劉啟安
• 申請（專利權）人: 江蘇康緣藥業股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 徐冬濤;尹慧晶

技術領域

本發明屬于中藥技術領域，具體涉及一種同時測定熱毒寧注射液中11種成分的方法。?

背景技術

熱毒寧注射液處方由金銀花、青蒿、梔子組成，具有清熱、疏風、解毒功效，臨床上用于治療上呼吸道感染^[1]。熱毒寧注射液成分研究表明，其主要含有咖啡酰奎寧酸類和環烯醚萜類化合物^[2]。前期研究建立了熱毒寧注射液HPLC指紋圖譜^[3]和一測多評法測定熱毒寧注射液中的9種成分^[4]，上述HPLC和一測多評方法運行時間較長，不利于工業化大生產過程中對產品的快速檢測，并且只檢測了梔子苷這一種環烯醚萜類成分，而環烯醚萜類物質在處方藥材梔子中含量較高^[5-6]，包括羥異梔子苷、山梔苷、京尼平龍膽雙糖苷等其他成分，這些成分對上呼吸道感染均具有一定程度的治療作用，僅檢測梔子苷含量不能更好的反映產品的質量和療效。因此，本發明建立了一種新的UPLC方法，增加檢測梔子中山梔苷、京尼平苷酸和京尼平龍膽雙糖苷等多種藥效指標成分，實現熱毒寧注射液中6種有機酸成分和5種環烯醚萜類成分的同時測定，達到縮短實際生產中的檢測時間，增加與產品療效相關的指標，進一步提升熱毒寧注射液的質控標準的目的。?

發明內容

本發明的目的是克服上述不足之處提供一種UPLC方法，可以同時測定熱毒寧注射液中11種成分(包括6種有機酚酸類物質和山梔苷、京尼平苷酸和京尼平龍膽雙糖苷等5種環烯醚萜類物質)。該方法是采用UPLC-DAD法同時測定熱毒寧注射液中新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、異綠原酸A、異綠原酸B、異綠原酸C、山梔苷、京尼平苷酸、京尼平龍膽雙糖苷、梔子苷、斷氧化馬錢子苷11種有效成分的含量。該方法與現有技術相比，可以大大縮短分析時間，提高分析?的靈敏度和分辨率，并增加了控制指標，進一步提高了熱毒寧注射液質控水平。?

本發明的目的是通過以下方式實現的：?

一種同時測定熱毒寧注射液中11種有效成分含量的方法，該方法包括以下步驟：?

a、對照品溶液的制備：分別精密稱取新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、異綠原酸A、異綠原酸B、異綠原酸C、山梔苷、京尼平苷酸、京尼平龍膽雙糖苷、梔子苷和斷氧化馬錢子苷對照品適量，加濃度為50％～100％的甲醇制成濃度分別為0.12-0.25，0.28-0.58，0.12-0.25，0.01-0.04，0.02-0.06，0.02-0.05，0.01-0.04，0.02-0.05，0.23-0.48，0.40-0.81，0.05-0.12mg·ml^-1的混合對照品溶液。?

b、供試品溶液的制備?

精密吸取1ml熱毒寧注射液置容量瓶中，用濃度為50％～100％的甲醇溶解并稀釋至100ml，搖勻，離心，上清液通過微孔濾膜濾過，即得。?

c、測定法：采用UPLC-DAD法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，即得；?

色譜條件：色譜柱Agilent?ZORBAX?SB-C18(3.0×100mm，1.8um)；以乙腈為流動相A，以0.1％磷酸為流動相B，按照下表進行梯度洗脫；檢測波長：324-326nm和236-238nm；流速：0.35-0.45mL.min^-1；柱溫：25-35℃。?

該方法中所述采用的濃度為50％-100％的甲醇均優選為濃度為50～70％的甲醇。?

上述同時測定熱毒寧注射液中11種有效成分含量的方法，優選包括以下步驟：?