[發(fā)明專利]黃皮果提取物及其在制備用于防治阿爾茨海默病藥物中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410712329.0
• 申請日: 2014-12-01
• 公開（公告）號: CN104383052B
• 公開（公告）日: 2016-11-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李文德;吳科鋒;黃韌;曾小斌;劉德承
• 申請（專利權(quán)）人: 廣東醫(yī)學(xué)院
• 主分類號: A61K36/75
• 分類號: A61K36/75;A61K31/7048;A61K31/352;A61P25/28
• 代理公司: 廣州新諾專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 44100
• 代理人: 吳澤燊

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及黃皮果提取物新的藥物用途，具體地涉及黃皮果提取物的制備及其在制備預(yù)防和治療阿爾茨海默病藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

阿爾茨海默病(Alzheimer's?disease,AD)是一種常見的神經(jīng)退行性疾病，也是最常見的老年癡呆癥之一，臨床特點表現(xiàn)為進行性記憶喪失和認(rèn)知功能損傷，其典型的病理特征為老年斑(Senile?plaques,SP)和神經(jīng)原纖維纏結(jié)(Neurofibrillary?tangles)的形成及受累腦區(qū)的突觸和神經(jīng)元受損。β淀粉樣蛋白(Beta-amyloid?peptide,Aβ)是老年斑的主要組成成分，研究表明Aβ具有神經(jīng)毒性，能夠誘發(fā)神經(jīng)細(xì)胞的損傷甚至死亡。盡管Aβ的神經(jīng)毒機理目前尚未完全闡明，但由其引發(fā)的氧化應(yīng)激和線粒體功能障礙被認(rèn)為在Aβ介導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞凋亡過程中發(fā)揮了關(guān)鍵作用。此外，Aβ誘發(fā)的氧化應(yīng)激有助于AD老年斑和神經(jīng)原纖維纏結(jié)的形成，也能促使神經(jīng)細(xì)胞胞內(nèi)產(chǎn)生氧化應(yīng)激反應(yīng)和線粒體能量代謝功能障礙并啟動一系列病理反應(yīng)致使AD病人腦區(qū)神經(jīng)元廣泛受損。因此,抑制Aβ生成，減少神經(jīng)元凋亡和改善認(rèn)知功能障礙對防治AD的發(fā)生和發(fā)展具有積極的意義。

蕓香科黃皮屬植物黃皮(Clausena?lansium)具有很高的藥用價值，其果、葉、種等均可入藥，過去的研究發(fā)現(xiàn)黃皮葉和黃皮果核中含有黃皮酰胺類化合物有保肝、促智的作用。但尚無證據(jù)表明黃皮果提取物能預(yù)防或治療由AD病引起的認(rèn)知功能障礙，也沒有相關(guān)報道指出黃皮果提取物能抑制Aβ的生成和減輕由此引起的神經(jīng)細(xì)胞凋亡。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供一種黃皮果提取物組合物，該組合物具有抗氧化、抑制Aβ的生成，減少星形膠質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞的活化，保護神經(jīng)元的作用，可應(yīng)用于制備防治阿爾茨海默病的藥物或保健食品。

本發(fā)明還提供了黃皮果提取物在預(yù)防與治療阿爾茨海默病藥物中的應(yīng)用，開辟了阿爾茨海默病防治的新方法。

本發(fā)明還提供了一種防治阿爾茨海默病藥物，該藥物具有抗氧化、抑制Aβ的生成，減少星形膠質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞的活化，保護神經(jīng)元的作用，從而可以有效緩解該病引起的認(rèn)知功能障礙，對防治阿爾茨海默病有較好的效果。

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的：

本發(fā)明所述的黃皮果提取物的總黃酮及有機酸含量≥75％，生物堿含量≥5％。

進一步地，鑒定出該黃皮果提取物包含四種黃酮類化合物，分別是(1).蘆丁(rutin)，(2).槲皮素(quercetin)-7-O-α-L-吡喃葡萄糖苷，(3).木犀草素(Luteolin)-4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，(4).槲皮素，所述黃酮類化合物的含量為≥60％；所述提取物還包括一種生物堿，是(5).黃皮酰胺(Clausenamide)，其含量≥5％所述五種化合物的結(jié)構(gòu)式如下：

黃酮類化合物:

化合物(1)

化合物(2)

化合物(3)

化合物(4)

生物堿類化合物

化合物(5)

本發(fā)明的另一技術(shù)目的是提供一種黃皮果提取物，其通過以下步驟制備而成：

(1).取曬干的黃皮果，去核，粉碎，過40目篩，得到黃皮果粉末；

(2).用乙醇浸泡步驟(1)所得的黃皮果粉末，超聲提取5次；

(3).過濾，合并濾液，離心，取上清液濃縮，然后再用石油醚萃取3次，每次石油醚萃取后分去上層萃取液，取下層液體揮去石油醚，再用乙酸乙酯萃取5次，分別合并上層乙酸乙酯萃取液和下層提取液，采用減壓蒸餾法進行濃縮，得到乙酸乙酯浸膏和下層提取液浸膏；

(4).分別用3-5倍體積的雙蒸水稀釋所述步驟(3)獲得的乙酸乙酯浸膏和下層提取液浸膏，混懸后分別通過大孔樹脂柱吸附，采用5-10倍柱體積的適度乙醇進行梯度洗脫，收集并合并所獲得洗脫液減壓濃縮至無醇味浸膏，即得所述黃皮果提取物。

進一步地，所述步驟(2)中乙醇的濃度為95％，乙醇的用量是9倍黃皮果粉末重量，浸泡時間為12-14h，超聲提取時間是每次1.5h。

進一步地，所述步驟(3)中離心的轉(zhuǎn)速為3000rpm/min，離心的時間為10min。

更進一步地，所述步驟(3)中上清液濃縮至相對密度1.20-1.45。