[發(fā)明專利]IDH1/2基因突變檢測(cè)體系及其試劑盒有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201410710286.2 | 申請(qǐng)日： | 2014-11-29 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN105368924B | 公開（公告）日： | 2019-01-11 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 趙新泰;王明;張長(zhǎng)順 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 上海賽安生物醫(yī)藥科技有限公司 |
| 主分類號(hào)： | C12Q1/6883 | 分類號(hào)： | C12Q1/6883 |
| 代理公司： | 上海海頌知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 31258 | 代理人： | 任益 |
| 地址： | 200436 上海市*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | idh1 基因突變 檢測(cè) 體系 及其 試劑盒 | ||
1.一種IDH1/2基因突變檢測(cè)體系，包括引物、探針和擴(kuò)增阻斷引物，其特征在于：
所述引物包括質(zhì)控正向引物、檢測(cè)正向引物和通用反向引物；
所述質(zhì)控正向引物包括針對(duì)IDH1基因C394T/G395A位點(diǎn)核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的質(zhì)控正向引物和針對(duì)IDH2基因G419A/G515A位點(diǎn)核苷酸序列如SEQ ID No.2所示的質(zhì)控正向引物；
所述檢測(cè)正向引物包括針對(duì)IDH1基因C394T突變位點(diǎn)核苷酸序列如SEQ ID No.3所示的檢測(cè)正向引物、針對(duì)IDH1基因G395A突變位點(diǎn)核苷酸序列如SEQ ID No.4所示的檢測(cè)正向引物、針對(duì)IDH2基因G419A突變位點(diǎn)核苷酸序列如SEQ ID No.5所示的檢測(cè)正向引物、針對(duì)IDH2基因G515A突變位點(diǎn)核苷酸序列如SEQ ID No.6所示的檢測(cè)正向引物；
所述通用反向引物作為檢測(cè)反向引物和質(zhì)控反向引物使用，包括針對(duì)IDH1基因C394T/G395A位點(diǎn)核苷酸序列如SEQ ID No.7所示的通用反向引物和針對(duì)IDH2基因G419A/G515A位點(diǎn)核苷酸序列如SEQ ID No.8所示的通用反向引物；
所述探針包括針對(duì)IDH1基因C394T/G395A位點(diǎn)的核苷酸序列如SEQ ID No.9所示的探針、針對(duì)IDH2基因G419A位點(diǎn)核苷酸序列如SEQ ID No.10所示的探針和針對(duì)IDH2基因G515A位點(diǎn)核苷酸序列如SEQ ID No.11所示的探針，所述探針序列的5’端設(shè)有一種熒光標(biāo)記，所述探針的核苷酸序列的3’端設(shè)有另一種熒光標(biāo)記；
所述擴(kuò)增阻斷引物是針對(duì)IDH2基因G419A位點(diǎn)核苷酸序列如SEQ ID No.12所示的擴(kuò)增阻斷引物，所述擴(kuò)增阻斷引物的核苷酸序列的3’端設(shè)有磷酸化修飾。
2.一種IDH1/2基因突變檢測(cè)體系，包括引物、探針和擴(kuò)增阻斷引物，其特征在于：
所述引物包括質(zhì)控正向引物、檢測(cè)正向引物和通用反向引物；
所述質(zhì)控正向引物包括針對(duì)IDH1基因C394T/G395A位點(diǎn)核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的質(zhì)控正向引物和針對(duì)IDH2基因G419A/G515A位點(diǎn)核苷酸序列如SEQ ID No.2所示的質(zhì)控正向引物；
所述檢測(cè)正向引物包括針對(duì)IDH1基因C394T突變位點(diǎn)核苷酸序列如SEQ ID No.13所示的檢測(cè)正向引物、針對(duì)IDH1基因G395A突變位點(diǎn)核苷酸序列如SEQ ID No.14所示的檢測(cè)正向引物、針對(duì)IDH2基因G419A突變位點(diǎn)核苷酸序列如SEQ ID No.15所示的檢測(cè)正向引物、針對(duì)IDH2基因G515A突變位點(diǎn)核苷酸序列如SEQ ID No.16所示的檢測(cè)正向引物；
所述通用反向引物作為檢測(cè)反向引物和質(zhì)控反向引物使用，包括針對(duì)IDH1基因C394T/G395A位點(diǎn)核苷酸序列如SEQ ID No.7所示的通用反向引物和針對(duì)IDH2基因G419A/G515A位點(diǎn)核苷酸序列如SEQ ID No.8所示的通用反向引物；
所述探針包括針對(duì)IDH1基因C394T/G395A位點(diǎn)的核苷酸序列如SEQ ID No.9所示的探針、針對(duì)IDH2基因G419A位點(diǎn)核苷酸序列如SEQ ID No.10所示的探針和針對(duì)IDH2基因G515A位點(diǎn)核苷酸序列如SEQ ID No.11所示的探針，所述探針序列的5’端設(shè)有一種熒光標(biāo)記，所述探針的核苷酸序列的3’端設(shè)有另一種熒光標(biāo)記；
所述擴(kuò)增阻斷引物是針對(duì)IDH2基因G419A位點(diǎn)核苷酸序列如SEQ ID No.17所示的擴(kuò)增阻斷引物，所述擴(kuò)增阻斷引物的核苷酸序列的3’端設(shè)有磷酸化修飾。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的IDH1/2基因突變檢測(cè)體系，其特征在于：所述探針序列的5’端設(shè)有FAM熒光標(biāo)記，所述探針的核苷酸序列的3’端設(shè)有BHQ1熒光標(biāo)記。
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