[發明專利]用于輔助鑒定大豆M型細胞質雄性不育恢復基因Rf-m1的分子標記的引物在審
| 申請號: | 201410707704.2 | 申請日: | 2014-12-01 |
| 公開(公告)號: | CN104450900A | 公開(公告)日: | 2015-03-25 |
| 發明(設計)人: | 王大剛;黃志平;張磊;李杰坤;胡國玉 | 申請(專利權)人: | 安徽省農業科學院作物研究所 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 230000 *** | 國省代碼: | 安徽;34 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 用于 輔助 鑒定 大豆 細胞質 雄性不育 恢復 基因 rf m1 分子 標記 引物 | ||
1.用于輔助鑒定大豆M型細胞質雄性不育恢復基因Rf-m1的分子標記的引物,其特征在于:所述引物是具有如SEQ?ID?NO:1所示核苷酸序列的上游引物和具有如SEQ?ID?NO:2所示核苷酸序列的下游引物。
2.如權利要求1所述引物用于制備鑒定大豆恢復性材料分子標記的方法,包括以下步驟:
(1)大豆材料基因組DNA的提取;
(2)對大豆基因組DNA進行PCR擴增;
PCR擴增反應體系為:4μL?Taq×Master?PCR?Mix,2.0μL濃度為1ppmol/L如權利要求1所述的上下游引物,20ng/μL模板DNA3μL,ddH201μL;反應總量10μL;PCR反應在PTC-2225熱循環儀上進行,反應程序包括:94℃預變性5min,每個循環95℃變性60s,55℃退火50s,72℃延伸60s,共30個循環,最后72℃延伸10min,12℃保存;
(3)反應產物在質量比8%非變性聚丙烯酰胺凝膠上電泳,用硝酸銀染色并于凝膠成像系統下觀察,記載。
3.如權利要求1所述引物在大豆M型細胞質雄性不育恢復基因分子標記輔助轉育中的應用。
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