[發明專利]一種二萜醇酯類化合物千金子1號的制備方法

有效

• 申請號: 201410707675.X
• 申請日: 2014-11-28
• 公開（公告）號: CN104447632A
• 公開（公告）日: 2015-03-25
• 發明（設計）人: 張耀洲;楊珊珊;顧朋嬡;李聰聰
• 申請（專利權）人: 天津耀宇生物技術有限公司
• 主分類號: C07D303/32
• 分類號: C07D303/32;C07D301/32;A61P35/00
• 代理公司: 天津市三利專利商標代理有限公司 12107
• 代理人: 李蕊

技術領域

本發明涉及化合物生產領域，尤其是一種二萜醇酯類化合物千金子1號的制備方法。

背景技術

千金子是一種少用的有毒中藥，主要含有大量脂肪油，還含有二萜、香豆素、揮發油等化合物，現代研究表明，二萜類化合物是其主要成分，也是其重要的活性成分。千金子含有結構獨特的千金二萜烷型成分L-factor(L-因子)，此類成分除具有諸多藥理活性外，其結構中的多個環可能通過跨環環合作用進一步產生復雜的多環結構。

惡性腫瘤是一種原因未明的嚴重疾病,目前以手術、放療、化療為主,手術多適用于早期癌瘤患者,放、化療只對敏感瘤種有效,但同時又會出現嚴重的毒副反應和后遺癥，甚至造成嚴重的醫源性疾病而危及生命，中草藥的抗癌作用受到越來越多的重視。目前，已有大量臨床研究證實中藥具有改善癌癥患者生存質量，延長生存期，穩定癌細胞，提高患病機體免疫力的作用。因此從天然產物中尋找有效的抗腫瘤物質是目前研究的一個大方向。

千金子1號(Euphorbia?factor?L1)是千金子中的主要活性成分，在種子中含量最高，千金子1號體外試驗顯示出良好的抗腫瘤作用，對HeLa細胞的增殖有明顯的抑制性,且呈劑量和時間依賴性。千金子1號體內外實驗研究都顯示出穩定的抗腫瘤活性,且與一般的抗腫瘤藥物不同，該藥不降低白細胞數和免疫器官指數。

發明內容

本發明所要解決的技術問題在于提供一種二萜醇酯類化合物千金子1號的制備方法。

為解決上述技術問題，本發明的技術方案是：

一種二萜醇酯類化合物千金子1號的制備方法，由千金子經過粉碎、提取濃縮、分離獲得，具體步驟如下：

(1)取千金子(市購)為原料，進行粉碎得到千金子粉末；

(2)千金子粉末進行有機溶劑提取，有機試劑為丙酮、乙醇、甲醇、乙酸乙酯一種或幾種的組合，收集提取后的上清，進行過濾，濃縮、干燥；

(3)將步驟(2)得到的沉淀重復1～5次提取，有機試劑為丙酮、乙醇、甲醇乙酸乙酯一種或幾種的組合，收集提取后的上清，進行過濾，濃縮、干燥，得到QJZ-6初提物；

(4)取步驟(3)得到QJZ-6初提物進行全部溶解，經制備液相DAC正相色譜柱進行分離，采用二元流動相體系進行洗脫分離，所述流動相A和流動相B采用正己烷、乙醇的組合，洗脫方式為梯度洗脫，檢測波長為210nm，收集目的峰，干燥后得到目標單體化合物QJZ-6。

上述目標單體化合物QJZ-6即為千金子1號(Euphorbia?factor?L1)，分子式為C₃₂H₄₀O₈(簡稱為QJZ-6)，分子量552.64，名稱為：6，17－環氧千金二萜醇－5，15－二乙酸－3－苯乙酸酯，其化學結構式為(Ⅰ)所示，

上述目標單體化合物QJZ-6的C-2、C-3、C-6、C-9手性碳原子S構型，C-4、C-5、C-11、C-15手性碳原子R構型。

優選的，上述二萜醇酯類化合物千金子1號的制備方法，所述步驟(2)、(3)中提取的溫度為40～60℃，提取時間為4～6h。

優選的，上述二萜醇酯類化合物千金子1號的制備方法，所述步驟(2)、(3)中所述千金子粉或沉淀與有機試劑的重量體積比按Kg：L計為1:(3～8)，將千金子粉或沉淀與有機試劑進行混合浸提。

上述二萜醇酯類化合物千金子1號可在制備抗腫瘤藥物中進行應用。

優選的，上述二萜醇酯類化合物千金子1號的應用，所述腫瘤為肝癌和/或肺癌。

本發明的有益效果是：

上述二萜醇酯類化合物千金子1號的制備方法，步驟簡便，重復性好，實用性高，適用于大規模工業化生產的需要，所分離純化的二萜醇酯類化合物千金子1號純度最高可高達99％，化合物性質穩定，具有抗癌活性。

附圖說明

圖1所示的是本發明所述QJZ-6單體的HPLC分析圖；

圖2所示的是本發明所述QJZ-6的核磁共振分析圖，其中(a)為1D1HNMR譜(CDCl3,400MHz)的數據圖譜，(b)為1D13CNMR譜(CDCl3,100MHz)的數據圖譜，(c)為HSQC數據圖譜，(d)為DEPT?135數據圖譜,(e)為COSY數據圖譜；

圖3是本發明實施例2制備液相正相色譜分離圖，其中橫坐標為采集時間(min)，縱坐標為信號強度(MV)，曲線為色譜曲線；

圖4是QJZ-6抑制人肝癌細胞Hep-g2生長的實時數據監測圖；