[發明專利]交聯聚合固載β-葡萄糖苷酶的方法有效
| 申請號: | 201410706930.9 | 申請日: | 2014-11-27 |
| 公開(公告)號: | CN104480096B | 公開(公告)日: | 2018-07-10 |
| 發明(設計)人: | 張志琪;賀天;張婧 | 申請(專利權)人: | 陜西師范大學 |
| 主分類號: | C12N11/08 | 分類號: | C12N11/08 |
| 代理公司: | 西安永生專利代理有限責任公司 61201 | 代理人: | 高雪霞 |
| 地址: | 710062 *** | 國省代碼: | 陜西;61 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 葡萄糖苷酶 纖維二糖 水解 交聯聚合 固載 聚甲基丙烯酸環氧丙酯 氨基功能化 硫酸銨沉淀 戊二醛交聯 活性影響 生化性質 樹脂微球 自聚體 交聯 制備 耗時 | ||
1.一種交聯聚合固載β-葡萄糖苷酶的方法,其特征在于:將β-葡萄糖苷酶完全溶解于20mmol/L pH值為4.8的醋酸鈉緩沖液中,加入氨基功能化的聚甲基丙烯酸環氧丙酯樹脂微球,混合均勻,加入沉淀劑,常溫震蕩20~40分鐘,離心洗滌,所得沉淀加入20mmol/L pH值為4.8的醋酸鈉緩沖液中,再加入質量分數為50%戊二醛水溶液,所得混合液中戊二醛的質量分數為0.2%~1%,室溫震蕩1~5小時,離心洗滌,得到固載β-葡萄糖苷酶;
上述的氨基功能化的聚甲基丙烯酸環氧丙酯樹脂微球的粒徑為2~5μm,氨基功能化的聚甲基丙烯酸環氧丙酯樹脂微球與β-葡萄糖苷酶的量比為1:0.2~0.8,β-葡萄糖苷酶與戊二醛的質量比為1:0.0005~0.01;其中沉淀劑為異丙醇、丙酮、飽和硫酸銨水溶液中的任意一種。
2.根據權利要求1所述的交聯聚合固載β-葡萄糖苷酶的方法,其特征在于:所述的氨基功能化的聚甲基丙烯酸環氧丙酯樹脂微球與β-葡萄糖苷酶的質量比為1:0.6。
3.根據權利要求1所述的交聯聚合固載β-葡萄糖苷酶的方法,其特征在于:所述的β-葡萄糖苷酶與戊二醛質量1:0.002~0.01。
4.根據權利要求1所述的交聯聚合固載β-葡萄糖苷酶的方法,其特征在于:所得混合液中戊二醛的質量分數為0.5%。
5.根據權利要求1所述的交聯聚合固載β-葡萄糖苷酶的方法,其特征在于:所述的沉淀劑為飽和硫酸銨水溶液。
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