[發明專利]一種銀杏葉原料及制劑中烷基酚類化合物的檢測方法

有效

• 申請號: 201410705090.4
• 申請日: 2014-11-27
• 公開（公告）號: CN104407082A
• 公開（公告）日: 2015-03-11
• 發明（設計）人: 李川;牛巍;鐘晨春;吳佩穎;高崎
• 申請（專利權）人: 中國科學院上海藥物研究所;上海杏靈科技藥業股份有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 上海光華專利事務所 31219
• 代理人: 許亦琳;余明偉

1.一種銀杏葉原料及制劑中烷基酚類化合物的檢測方法，采用高效液相色譜分離、電噴霧離子源高分辨串聯飛行時間質譜同時測定銀杏葉中多種烷基酚類化合物的含量，其中，所述銀杏葉中的烷基酚類化合物包括有銀杏酸類化合物、雷鎖酸類化合物、漆酚類化合物。

2.根據權利要求1所述的一種銀杏葉原料及制劑中烷基酚類化合物的檢測方法，其特征在于，所述銀杏葉中的烷基酚類化合物為：31種烷基酚類化合物，其中，銀杏酸類化合物為22種：銀杏酸C13:0、銀杏酸C13:1、銀杏酸C14:0、銀杏酸C14:1、銀杏酸C15:0、銀杏酸C15:1、銀杏酸C15:2、銀杏酸C15:3、銀杏酸C16:0、銀杏酸C16:1、銀杏酸C16:2、銀杏酸C17:0、銀杏酸C17:1、銀杏酸C17:2、銀杏酸C17:3、銀杏酸C18:0、銀杏酸C18:1、銀杏酸C19:0、銀杏酸C19:1、銀杏酸C19:2、銀杏酸C19:3、銀杏酸C19:4；雷鎖酸類化合物為3種：雷鎖酸C15:0、雷鎖酸C15:1、雷鎖酸C17:1；漆酚類化合物為6種：漆酚C13:0、漆酚C14:0、漆酚C14:1、漆酚C15:1、漆酚C15:2、漆酚C17:1。

3.根據權利要求1所述的一種銀杏葉原料及制劑中烷基酚類化合物的檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)在銀杏葉粉末中加入正己烷溶劑，震蕩、超聲萃取后，離心，取上清液；

2)重復步驟1)，將收集的上清液震蕩混合后，取一定量上清液用N₂氣吹干，再用乙腈復溶，震蕩離心后，取上清液，待測；

3)配制混合標準溶液；

4)定性檢測：采用HPLC-ESI-Q-TOF-MS測定步驟2)中的待測液，根據精確分子質量、相對保留時間，確定待測液中的31種烷基酚類化合物成分；

5)定量檢測：采用HPLC-ESI-Q-TOF-MS分別測定步驟2)中的待測液和步驟3)中的混合標準溶液，采用外標法對待測液中的31種烷基酚類化合物成分含量進行定量及半定量檢測。

4.根據權利要求3所述的一種銀杏葉原料及制劑中烷基酚類化合物的檢測方法，其特征在于，步驟1)中，所述震蕩、超聲萃取條件為：先震蕩2.5-3.5min，再超聲萃取14.5-15.5min，然后再震蕩2.5-3.5min；震蕩頻率：2500-3500rpm/min；超聲功率：56-60KHz；所述離心條件為：離心時間：9.5-10.5min；轉速：2500-3500rpm/min。

5.根據權利要求3所述的一種銀杏葉原料及制劑中烷基酚類化合物的檢測方法，其特征在于，步驟2)中，所述重復步驟1)的次數為2-3次；所述震蕩混合條件為：震蕩時間2.5-3.5min；震蕩頻率：2500-3500rpm/min。

6.根據權利要求3所述的一種銀杏葉原料及制劑中烷基酚類化合物的檢測方法，其特征在于，步驟2)中，所述震蕩離心條件為：震蕩時間：4.5-5.5min；震蕩頻率：1400-1800rpm/min；離心時間：9.5-10.5min；轉速：11000-17000rpm/min。

7.根據權利要求4所述的一種銀杏葉原料及制劑中烷基酚類化合物的檢測方法，其特征在于，步驟4)中，所述精確分子質量是指，烷基酚類化合物成分的精確分子質量及該成分形成的[M－H]－峰的精確分子質量。

8.根據權利要求4所述的一種銀杏葉原料及制劑中烷基酚類化合物的檢測方法，其特征在于，步驟4)或5)中，所述高效液相色譜的色譜條件為：色譜柱：BEH?C₁₈色譜柱；柱溫：40-50℃；流速：0.3-0.5ml/min；進樣量：5μl；流動相：含甲酸的甲醇-水溶液，分析時間：10min；梯度洗脫。

9.根據權利要求8所述的一種銀杏葉原料及制劑中烷基酚類化合物的檢測方法，其特征在于，所述流動相中，A相為含0.2‰甲酸、體積比為1:99的甲醇-水溶液，B相為含0.2‰甲酸、體積比為99:1的甲醇-水溶液；所述梯度洗脫程序的具體為：0-6min，A相：B相體積比為30：70-2：98；6-8min，A相：B相體積比為2：98-2：98；8-10min，A相：B相體積比為2：98-30：70。

10.根據權利要求4所述的一種銀杏葉原料及制劑中烷基酚類化合物的檢測方法，其特征在于，步驟4)或5)中，所述電噴霧離子源高分辨串聯飛行時間質譜的檢測條件為：離子源：ESI源；檢測模式：負離子電噴霧電離模式；掃描模式：Sensitivity模式；數據采集模式：MS^E；掃描范圍：m/z?50-1000amu；掃描時間：0.3s。