[發明專利]高分子銪熒光探針及其制備方法、磺草酮農藥檢測試劑盒

在審

• 申請號: 201410697281.0
• 申請日: 2014-11-26
• 公開（公告）號: CN104910310A
• 公開（公告）日: 2015-09-16
• 發明（設計）人: 沈金燦;韓瑞陽;謝冬冬;肖陳貴;肖鋒;張毅;華紅慧
• 申請（專利權）人: 深圳市檢驗檢疫科學研究院;深圳出入境檢驗檢疫局食品檢驗檢疫技術中心
• 主分類號: C08F212/08
• 分類號: C08F212/08;C08F212/36;C08F230/04;C08J9/26;C09K11/06;G01N33/64;G01N21/64
• 代理公司: 深圳中一專利商標事務所 44237
• 代理人: 張全文

技術領域

本發明屬于農藥殘留檢測技術領域，具體涉及一種高分子銪熒光探針及其制備方法、磺草酮農藥檢測試劑盒和磺草酮農藥的一種檢測方法。

背景技術

農藥是當前農業生產中用于防治病、蟲、雜草對農作物危害不可缺少的物質。農藥的大面積使用也帶來了嚴重的食品安全與環境問題，農藥殘留污染環境、污染農產品，影響農產品出口，引起人、畜中毒事故。我國蔬菜產業目前仍屬于小農經濟，生產規模不大，市場小而散，產銷方式多為即采即售。因此，要有效防止“毒菜”流入市場，無疑需要很大的檢測量，而建立既簡便、快速又經濟有效的樣品前處理及檢測方式是解決這一問題的關鍵。因此，為有效監測農藥殘留，發展高靈敏、高選擇性、快速、可靠和低成本的檢測技術具有十分重要的意義。

常用的農藥殘留快速檢測技術有酶抑制法、免疫分析法等。酶抑制法測定樣品和農藥種類有限，目前只用于蔬菜、水果中有機磷和氨基甲酸酯類農藥的殘留檢測，且不能給出定性和定量結果。免疫分析法具有簡單、快速、靈敏度高、特異性強、檢測費用低等優點，只需很少的儀器設備和專業培訓，是農藥殘留快速篩查的好方法。但是，免疫分析是以抗體、酶等一些脆弱的生物活性物質作為分子識別單元，這些生物活性物質易失活，缺乏保存和操作的穩定性，操作條件苛刻、繁瑣；其次，并非所有的農藥分子都適用于免疫分析，一些沒有特征結構的農藥分子無法設計相應的半抗原；第三，抗體或標記抗體的制備和純化難度大，無法重復使用，因此免疫分析的成本依然較高。免疫分析的這些局限性在很大程度上限制了它們在農殘快篩檢測中的廣泛應用。

在現有檢測農藥的殘留農藥化合物中，磺草酮是最為常見的一種農藥之一。磺草酮為三酮類除草劑，主要用于防治玉米、甘蔗與小麥田雜草的廣譜除草劑，具有穩定性強、兼容性好、除草效果佳等優點，已在許多國家得到廣泛的應用。目前農藥(磺草酮)殘留分析的主要手段為基于色譜、質譜及色譜-質譜聯用的大型精密儀器分析法，采用儀器分析法雖然方法靈敏度高、準確度好等優點，然而這些方法存在著樣品處理步驟復雜繁瑣，分析時間長，儀器設備昂貴、龐大，檢測成本高，難以實現現場(在線)檢測等問題，無法滿足目前市場急需的經濟、快速、簡便的農藥殘留檢測需求。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的上述不足，提供一種磺草酮農藥檢測試劑盒和磺草酮農藥的一種檢測方法，旨在解決現有檢測磺草酮農藥殘留方法存在的檢測步驟繁瑣，時間長，成本高，靈敏度不高等技術問題。

本發明的另一目的在于提供一種有對磺草酮農藥具有特異識別和檢測功能的高分子高子銪熒光探針及其制備方法。

為了實現上述發明目的，本發明的技術方案如下：

一種高分子銪熒光探針的制備方法，包括如下步驟：

將銪金屬鹽溶液與帶不飽和雙鍵的配位化合物、磺草酮農藥進行反應，制備出銪多配位復合物；

將所述銪多配位復合物在交聯劑作用下發生分子印跡聚合反應，生成高分子銪熒光探針。

以及，一種高分子銪熒光探針，所述高分子銪熒光探針為上述的高分子銪熒光探針的制備方法制備獲得的高分子銪熒光探針。

以及，一種磺草酮農藥檢測試劑盒，其包括聚合物酶聯板和結合在所述聚合物酶聯板上的高分子銪熒光探針，所述高分子銪熒光探針為本發明高分子銪熒光探針，其中，所述高分子銪熒光探針中的磺草酮模板分子被洗脫。

以及，一種磺草酮農藥的檢測方法，包括如下步驟：

獲取含有待測樣品的溶液；

將如上述的磺草酮農藥檢測試劑盒中含有高分子銪熒光探針的聚合物酶聯板進行浸泡處理2.0-8.0小時；

將所述含有待測樣品的溶液加入經浸泡處理后的聚合物酶聯板孔中進行震蕩反應10-30min，然后對所述聚合物酶聯板進行洗滌；

將經洗滌處理后的所述聚合物酶聯板置于熒光酶標儀測定相應孔的熒光強度，從而得出磺草酮的量。

與現有技術相比，上述高分子銪熒光探針的制備方法將高度靈敏的銪熒光檢測與分子印跡相結合，制備出的高分子銪熒光探針能夠利用分子印跡技術的識別特性，完成對磺草酮的特異識別，其后將分析結果以熒光的形式表達出來，從而使得該高分子銪熒光探針對磺草酮具有抗干擾、高選擇性、高靈敏度特點，同時Stokes位移大，發射線狀光譜，熒光壽命長，熒光穩定。另外，其制備方法簡單，制備的高分子銪熒光探針性能穩定。