[發明專利]新型基于抗體偶聯化療藥物納米ADC及制備方法和應用

有效

• 申請號: 201410696189.2
• 申請日: 2014-11-26
• 公開（公告）號: CN104491868B
• 公開（公告）日: 2017-11-24
• 發明（設計）人: 李威
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第二軍醫大學
• 主分類號: A61K47/38
• 分類號: A61K47/38;A61K31/704;A61K31/5365;A61K9/14;A61K9/107;A61P35/00
• 代理公司: 上海卓陽知識產權代理事務所(普通合伙)31262
• 代理人: 巫蓓麗

1.抗體與藥物偶聯技術及其偶聯物所自組裝成的納米粒子，其特征在于，所述納米粒子是由巰基化的抗體與帶有雙硫鍵的化療藥物在液相環境中自組裝形成的，具有下的結構：

(Drug)_n—mAb

其中mAb代表單克隆抗體，drug代表化療藥物，n為偶聯上的藥物數目，n值為1-80；所述納米粒子為膠束狀核殼結構，疏水性的化療藥物包裹在膠束內核中，親水性抗體形成膠束狀外殼；所述膠束粒徑大小為20-1000nm；所述每個納米粒子中化療藥物的分子數目為1-10000；所述化療藥物為阿霉素或美登素；所述單克隆抗體為Her2或CD20。

2.權利要求1所述的納米粒子的制備方法，其特征在于，包括下述步驟：

第一步：化療藥物與帶有雙硫鍵的交聯劑，溶于甲醇后，室溫下避光攪拌反應6天，得到帶有雙硫鍵的化療藥物；所述的交聯劑為肼基-4-(2-吡啶二硫代)丁酸(PDPH)、SMCC、SPDP、VCP；

第二步：用2-IT(2-亞氨基硫烷鹽酸鹽)與抗體在pH＝7.4的PBS下反應，將抗體進行巰基化；

第三步：將巰基化的抗體用PBS稀釋，加入雙硫鍵的化療藥物的甲醇溶液，通N₂，密封，室溫搖床下反應4h，置于4℃冰箱24h，離心純化；

第四步：取5ml離心純化的產物加入到50ml的旋蒸瓶中，通入氮氣，旋轉蒸發制備抗體包裹化療藥物的納米粒子，所述旋轉蒸發的條件為：轉速60rpm，溫度25℃，旋轉蒸發時間為3.5h，氮氣流速為10mL/min。

3.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述的化療藥物為阿霉素或美登素；所述的抗體為Her2或CD20。

4.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述第一步化療藥物與帶有雙硫鍵的交聯劑質量比為27.25:11.78，攪拌速度為100rpm、500rpm、1000rpm、5000rpm。

5.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述第二步抗體與2-IT的質量比為1000：75；所述巰基化后每個抗體結合7-8個巰基。

6.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述第三步巰基化的抗體與帶有雙硫鍵的化療藥物的質量比為1:1；所述離心純化條件為：離心溫度20℃，離心速度1500rpm，離心時間10min。

7.權利要求1所述的納米粒子在制備治療胃癌藥物中的應用。

8.權利要求1所述的納米粒子在制備抑制胃癌細胞N87生長的藥物中的應用。