[發明專利]一種用于鑒定三系雜交水稻不育系駿1A的特異引物組合有效
| 申請號： | 201410693230.0 | 申請日： | 2014-11-26 |
| 公開（公告）號： | CN104404147A | 公開（公告）日： | 2015-03-11 |
| 發明（設計）人： | 徐鑫;劉學群;譚艷平;王春臺;熊杰 | 申請（專利權）人： | 中南民族大學 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 武漢華旭知識產權事務所 42214 | 代理人： | 周宗貴;劉榮 |
| 地址： | 430074 湖北*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 鑒定 雜交 水稻 不育 特異 引物 組合 | ||
1.一種用于鑒定三系雜交水稻不育系駿1A的特異引物組合，其特征在于：包括ZJJU01、ZJJU02、ZJJU03和ZJJU04，其中ZJJU01正向引物如序列表中SEQ?ID?NO.1：GAGAGAGAGAGAGAGACACTATTAACG；
ZJJU?01反向引物如序列表中SEQ?ID?NO.2：GAGAGAGAGAGAGAGACGGAGG；
ZJJU?02正向引物如序列表中SEQ?ID?NO.3：TCTCTCTCTCTCTCTCAAACAGAA；
ZJJU?02反向引物如序列表中SEQ?ID?NO.4：CTCTCTCTCTCTCTCACTGTCG；
ZJJU?03正向引物如序列表中SEQ?ID?NO.5：TCAGTAGCTGTGTCTCAGAACTATGAC；ZJJU?03反向引物如序列表中SEQ?ID?NO.6：GTACCTCTTTTCGGCCAGGA；
ZJJU?04正向引物如序列表中SEQ?ID?NO.7：GGATAATCCGCATCAAGAAG；
ZJJU?04反向引物如序列表中SEQ?ID?NO.8：GGTCACCCGAGAATTGCAT。
2.一種基于權利要求1所述的引物組合的鑒定三系雜交水稻不育系駿1A的方法，其特征在于步驟如下：首先提取目標植物基因組，然后以基因組為模板，用權利要求1所述的特異引物組合進行PCR檢測。
3.根據權利要求2所述的鑒定三系雜交水稻不育系駿1A的方法，其特征在于：所述的PCR反應條件為：95℃5min；95℃變性30s，65℃退火40s，其中每個循環降低0.7℃，72℃延伸1min30s，15個循環；
94℃變性30s，55℃退火45s，72℃延伸2min，25個循環；72℃后延伸10min。
4.根據權利要求2或3所述的鑒定三系雜交水稻不育系駿1A的方法，其特征在于：所述的PCR反應體系為：50ng/μl的DNA模板0.8μl，10×PCR緩沖液1μl，2.5mM?dNTPs0.8μl，10μM正、反向引物各0.2μl，DNA聚合酶0.5U，ddH2O補足至10μl。
5.一種含有權利要求1所述特異引物組合的檢測試劑盒。
6.權利要求5所述試劑盒在鑒定三系雜交水稻不育系駿1A的純度以及輔助其育種中的應用。
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