[發明專利]吡唑醚菌酯分子印跡聚合物的制備方法

在審

• 申請號: 201410688522.5
• 申請日: 2014-11-26
• 公開（公告）號: CN104387532A
• 公開（公告）日: 2015-03-04
• 發明（設計）人: 賈明宏;劉慧君;李體文
• 申請（專利權）人: 北京農學院;李體文
• 主分類號: C08F222/14
• 分類號: C08F222/14;C08F220/06;C08J9/28;B01J20/26;B01J20/30
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種生化技術領域的制備方法，具體涉及一種吡唑醚菌酯分子印跡聚合物(molecularly?imprinted?polymer，MIP)?的制備方法。

背景技術

吡唑醚菌酯是一種新型廣譜甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑，通過直接破壞線粒體呼吸鏈，控制子囊菌綱、擔子菌綱、卵菌綱和半知菌綱等真菌性病原菌的擴展，從而有效防治葡萄霜霉病、黃瓜白粉病、柑橘炭疽病、香蕉黑星病和葉斑病等多種植物性病害，在全球范圍內廣泛、大量應用于植物病害防治。近10年來，吡唑醚菌酯銷售額在全球農藥銷售額中排名前十。

吡唑醚菌酯的廣泛、大量、長期使用，增加了吡唑醚菌酯在環境和食品中的殘留量，提高了吡唑醚菌酯對環境和食品安全的風險。根據吡唑醚菌酯的日允許攝入量（ADI），2014年我國規定了吡唑醚菌酯在油料作物、水果和蔬菜上的最大殘留限量（MRL），并制定了相應的標準。為評價吡唑醚菌酯對環境和食品的風險和危害，需對環境和食品中吡唑醚菌酯殘留量進行檢測。

分子印跡技術是近年來基于分子識別理論而迅速發展起來的一個新的研究領域。分子印跡聚合物能夠特異性地與模板分子發生作用，并且可以通過相應的方法洗脫，從而達到純化和富集目的分子的作用。本發明利用分子印記技術，基于分子識別，以吡唑醚菌酯為模板分子，制備吡唑醚菌酯分子印記聚合物，聚合物合成后將模板分子洗脫，洗脫模板分子后的聚合物保留了和模板分子互補的空間結構和基團，具有“記憶”功能，可特異的和吡唑醚菌酯作用，能夠快速、高選擇性地從復雜的環境基質和果蔬樣品中萃取吡唑醚菌酯，再通過相應的方式洗脫，加以富集和純化，以達到儀器分析的檢測要求，從而對環境和食品中的吡唑醚菌酯殘留量進行檢測。采用分子印跡聚合物進行農殘樣品的前處理，可減少有機溶劑的使用，抵抗酸堿等惡劣環境，且使用過的分子印記聚合物在洗脫活化后可重復使用，安全、經濟、環保，具有廣泛的應用前景。

發明內容

本發明的目的在于提供一種吡唑醚菌酯分子印跡聚合物的制備方法，為吡唑醚菌酯在環境和農產品中的殘留檢測提供凈化方法。本發明所制備的分子印跡聚合物對吡唑醚菌酯具有特異性結合作用，可以選擇性地結合吡唑醚菌酯，從而實現去除介質中的雜質，對吡唑醚菌酯進行濃縮、凈化，提高現有檢測方法靈敏度的目的。

本發明是通過以下技術方案實現的，發明包括步驟如下：

(1)?將模板分子吡唑醚菌酯、功能單體甲基丙烯酸(MAA)?和交聯劑乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)，按一定比例，混合溶解在制孔劑中，加入引發劑；

(2)?通入氮氣去氧，真空封管后，進行水浴保溫反應；

(3)?合成好的聚合物經真空干燥后磨碎，獲得模板分子聚合物；

(4)?通過索氏提取，去除模板分子；

(5)?將除去模板分子的聚合物經真空干燥至恒重，獲得吡唑醚菌酯的分子印跡聚合物。

模板分子∶功能單體∶交聯劑摩爾比為1∶4∶20。

當模板分子為0.2mol?時，制孔劑體積為20ml，所述的制孔劑為乙腈。

所述的引發劑為偶氮二異丁腈。

研磨模板分子聚合物粒徑為0.4～0.6μm；

所述水浴保溫反應溫度為60-65℃，反應時間為24-30小時。

所述的索氏萃取溫度，時間為12?小時。

所述的索氏提取水浴溫度為85-90℃，萃取溶劑為甲醇-乙酸混合液(v：v，9∶1)。

所述的索氏萃取，其條件為萃取3?次，每次4?小時，最后用純甲醇洗至1～2?次，除去剩余的乙酸。

本發明制備的分子印跡聚合物對吡唑醚菌酯具有特異性吸附作用，可作為固相萃取的填料，對環境和食品中的吡唑醚菌酯進行分離和富集，結合色譜檢測方法（HPLC法），對環境和食品中的吡唑嘧菌酯殘留進行檢查。此外，分子印跡聚合物也可以開發成色譜填料，用于痕量吡唑醚菌酯的檢測。因此，本發明制備的分子印跡聚合物，可顯著提高吡唑醚菌酯檢測靈敏度和檢測效率，具有較大的推廣應用價值。

附圖說明

圖1?MIPs吸附等溫線。

具體實施方式

本實施例在以本發明技術方案為前提下進行實施，本方明的保護范圍包括但不限于下述實施例。本發明實施例的實施方式和具體操作過程如下：

實施例1

將吡唑醚菌酯0.2?mmol和MAA?0.8?mmol溶解于10?mL?乙腈中后，加入EDMA?4?mmol混勻，室溫靜置1小時后，加入引發劑偶氮二丁乙腈?40?mg；