[發明專利]一種環二肽的生產方法

有效

• 申請號: 201410686957.6
• 申請日: 2014-11-24
• 公開（公告）號: CN104447759A
• 公開（公告）日: 2015-03-25
• 發明（設計）人: 張艷榮;劉婷婷;王大為;張雁南
• 申請（專利權）人: 吉林農業大學
• 主分類號: C07D487/04
• 分類號: C07D487/04
• 代理公司: 吉林長春新紀元專利代理有限責任公司 22100
• 代理人: 魏征驥

技術領域

本發明屬于天然化合物的合成技術領域，尤其是指一種環(組氨酸-脯氨酸)二肽的生產方法。

背景技術

環二肽是由兩個氨基酸殘基通過一對互補的酰胺鍵互相連接而形成的一個穩定的六元環結構。由于其具有內在構象的約束作用，環二肽較直鏈二肽更穩定，不易被蛋白酶水解，在體內的半衰期比相應的二肽分子長。此外，環二肽分子中的兩個肽鍵成為氫鍵給體和氫鍵受體，而氫鍵是藥物與受體相互作用的主要方式之一，因此環二肽在藥物化學中是一個非常重要的藥效團。

環(組氨酸-脯氨酸)二肽[Cyclo(His-Pro)，CHP]是一種內源性環二肽，由促甲狀腺素釋放激素經焦谷氨酸氨肽酶水解脫去焦谷氨酸后環化而成，廣泛分布于人和動物的組織和體液中。CHP可以減緩乙醇的麻醉作用及低體溫癥狀、對抗某些中樞抑制藥物的毒副作用，并且能刺激血糖代謝，對Ⅱ型糖尿病人的血糖水平起到一定的控制作用。CHP結構簡單,能通過血腦屏障，成為有效治療糖尿病、吸毒、嗜酒及某些行為疾病的一種短肽類藥物。

從天然產物中分離提取CHP不僅步驟繁瑣且效率低下，因此采用化學合成法合成CHP具有重要的意義。目前CHP的化學合成法主要采用甲醇回流法，即將N-端游離的二肽甲酯在低沸點的甲醇中加熱回流合成環二肽。雖然甲醇回流法可以得到較理想的產物得率，但是此法的反應速率很慢，而且會導致各種程度的消旋,使CHP的功效減弱甚至消失。

發明內容

本發明提供一種環二肽的生產方法,以解決目前甲醇回流法中存在的反應速率很慢，而且會導致各種程度的消旋,使CHP的功效減弱甚至消失的問題。

本發明采取的技術方案是，包括下列步驟：

(一)低溫保護氨基酸氨基

以L-組氨酸為原料，將其溶于水-四氫呋喃(v/v＝1:2)溶劑中，L-組氨酸的濃度為0.25～0.50mol/L，以二碳酸二叔丁酯[(Boc)₂O]為保護劑進行氨基保護，首先配制四氫呋喃-(Boc)₂O溶液，其中(Boc)₂O濃度為1～1.5mol/L，加到含L-組氨酸的pH8～9的堿水溶液中，His︰(Boc)₂O(mol/mol)＝1:(2～2.5)，-5℃～-10℃下攪拌反應15～30min，攪拌速率80～100r/min，然后升溫至30℃～40℃攪拌反應4～6h，反應結束后于溫度38℃、真空度為-0.1MPa條件下減壓脫除有機溶劑，剩余物1:(18～20)(g/mL)比例加水溶解，用乙醚洗滌2～3次，每次洗滌時水相：乙醚相(v/v)＝2：1，脫除殘留的(Boc)₂O，然后于0℃條件下用質量濃度為50％的檸檬酸溶液調酸至pH3～4，得到游離的N^im-Boc-N^α-Boc-L-組氨酸，最后用乙酸乙酯萃取3～4次，每次萃取時水相/乙酸乙酯相(v/v)＝1︰1，萃取氨基被保護的后L-組氨酸，然后再于溫度35℃、真空度為-0.1MPa條件下減壓蒸干脫除乙酸乙酯，得到氨基已被保護的L-組氨酸，此過程將L-組氨酸的N-端氨基和側鏈咪唑基用叔丁氧羰基(Boc-)保護，生成N^im-Boc-N^α-Boc-L-組氨酸；

(二)低溫保護氨基酸羧基

將L-脯氨酸懸浮于無水甲醇中，L-脯氨酸在無水甲醇中濃度為0.2～0.5mol/L，冷卻到0℃，向體系中通入干燥HCl氣體，通氣攪拌反應2～3h，攪拌速率為80～100r/min，反應結束后于溫度35℃、真空度為-0.1MPa條件下減壓蒸發除去甲醇和過量的HCl，得到C-端羧基被保護的L-脯氨酸甲酯鹽酸鹽；

(三)形成肽鍵