[發明專利]一種直觀檢測蛋白棒貯藏穩定性變化的方法在審
| 申請號: | 201410677500.9 | 申請日: | 2014-11-21 |
| 公開(公告)號: | CN104406946A | 公開(公告)日: | 2015-03-11 |
| 發明(設計)人: | 周鵬;李娟;賈曉戈;陸乃彥;張軒 | 申請(專利權)人: | 江南大學 |
| 主分類號: | G01N21/64 | 分類號: | G01N21/64 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 214122 江蘇*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 直觀 檢測 蛋白 貯藏 穩定性 變化 方法 | ||
1.一種直觀檢測蛋白棒貯藏穩定性變化的方法,其特征是將熒光染色的蛋白棒模型體系采用熒光漂白恢復技術測定其分子遷移情況。
2.如權利要求1所述的一種直觀檢測蛋白棒貯藏穩定性變化的方法,其特征是樣品熒光染色具體工藝為:配制0.1~0.4mg/mL的異硫氰酸熒光素(FITC)/丙酮染色液,將4~8μg該染色液滴加于0.5~1.0g的樣品中并進行混合;混合均勻后,將其中0.3g樣品轉移至玻底培養皿中,蓋上蓋玻片,并用AB膠封邊;最后,將染色好的樣品置于25℃恒溫培養箱中并避光儲存;此后,分別于第1、3、7d進行取樣測定。
3.如權利要求1所述的一種直觀檢測蛋白棒貯藏穩定性變化的方法,其特征是熒光漂白恢復技術具體操作為:將染色好的待測樣品置于激光掃描顯微鏡的載物臺上,并設定樣品激發波長為485~495nm,發射波長為500~530nm,在1~20倍目鏡下進行樣品觀測;在觀察區域內選擇邊長為20~50μm的正方形區域作為漂白范圍;設定熒光漂白強度100%,漂白程度為80%~100%;之后,實時監測漂白區域FITC-蛋白體系的熒光恢復情況,每隔一段時間進行圖像采集記錄熒光恢復情況。
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