[發明專利]一種新型抗菌肽Hep-W及其制備方法和應用在審
| 申請號： | 201410673569.4 | 申請日： | 2014-11-21 |
| 公開（公告）號： | CN104945497A | 公開（公告）日： | 2015-09-30 |
| 發明（設計）人： | 張文薈;鐘誠;鄧文穎;吳慶儒;蔣正芳;趙燕 | 申請（專利權）人： | 南京國龍生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C07K14/47 | 分類號： | C07K14/47;C12N15/12;C12N15/81;A23K1/17;A23K1/18;A61K38/17;A61P31/04;C12R1/84 |
| 代理公司： | 常州佰業騰飛專利代理事務所(普通合伙) 32231 | 代理人： | 張榮 |
| 地址： | 210000 江蘇省南京市南京經*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 新型 抗菌 hep 及其 制備 方法 應用 | ||
1.一種新型抗菌肽Hep-W，其特征在于，所述抗菌肽Hep-W氨基酸序列如SEQ?ID?NO:1所示。
2.如權利要求1所述新型抗菌肽Hep-W，其特征在于，所述新型抗菌肽Hep-W核苷酸序列如SEQ?ID?NO:2所示。
3.權利要求1所述新型抗菌肽Hep-W的制備方法，包括以下步驟：
1)新型抗菌肽Hep-W基因的設計與合成：參照畢赤巴斯德酵母的偏好密碼子，對豬成熟肽Hepcidin的基因進行改造，改造并合成新型抗菌肽Hep-W基因；
2)新型抗菌肽Hep-W表達載體的構建與鑒定；將新型抗菌肽Hep-W基因序列與pGAPZαA相連接獲得的表達載體pGAPZαA-Hep-W在感受細胞內表達，對表達后的表達載體pGAPZαA-Hep-W進行PCR和雙酶切鑒定，獲得測序正確的表達載體；
3)新型抗菌肽Hep-W真核表達載體的構建：將測序正確的表達載體pGAPZαA-Hep-W轉入畢赤巴斯德酵母，獲得重組酵母菌，對重組酵母菌進行鑒定；
4)新型抗菌肽Hep-W的獲得：將鑒定正確的重組酵母菌培養后進行滅活、破碎并純化，即獲得新型抗菌肽Hep-W。
4.如權利要求3所述的制備方法，其特征在于：所述步驟2)、3)中鑒定過程采用的引物對上下游引物序列分別為SEQ?ID?NO:3、SEQ?ID?NO:4。
5.如權利要求3所述的制備方法，其特征在于：所述步驟3)種表達載體pGAPZαA-Hep-W通過電轉化法轉入畢赤巴斯德酵母。
6.權利要求1-5任一項所述新型抗菌肽Hep-W作為畜禽飼料添加劑或畜禽疾病的預防和治療的應用。
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