[發明專利]牛輪狀病毒VP8*亞單位重組嵌合蛋白及其應用

在審

• 申請號: 201410668656.0
• 申請日: 2014-11-20
• 公開（公告）號: CN104479028A
• 公開（公告）日: 2015-04-01
• 發明（設計）人: 聞曉波;朱光怡;冉旭華;苗艷;張峣;曹思;倪宏波;朱戰波
• 申請（專利權）人: 黑龍江八一農墾大學
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/70;A61K39/15;A61P31/14
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君

1.牛輪狀病毒VP8*亞單位重組嵌合蛋白，其特征在于，其是由破傷風毒素T細胞表位多肽P2以及基因型為G6P[5]的牛輪狀病毒VP8*亞單位的截短形式a和截短形式b嵌合而成的重組蛋白；其中，截短形式a和截短形式b之間無多余氨基酸，且為多拷貝，在破傷風毒素T細胞表位多肽P2、多拷貝的基因型為G6P[5]的牛輪狀病毒VP8*亞單位的截短形式a和截短形式b之間通過柔性Linker連接；

其中，所述破傷風毒素T細胞表位多肽P2、基因型為G6P[5]的牛輪狀病毒VP8*亞單位的截短形式a和截短形式b的氨基酸序列分別如SEQ?ID?No.1-3所示。

2.根據權利要求1所述的重組嵌合蛋白，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ?ID?No.4所示，或該序列經替換、缺失或添加一個或幾個氨基酸形成的具有同等功能的氨基酸序列。

3.編碼權利要求2所述重組嵌合蛋白的基因。

4.如權利要求3所述的基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ?ID?No.5所示。

5.含有權利要求3或4所述基因的表達載體。

6.含有權利要求3或4所述基因的宿主細胞。

7.制備權利要求1或2所述重組嵌合蛋白的方法，其特征在于，將權利要求5所述的表達載體轉化至大腸桿菌感受態細胞中，篩選陽性克隆并接種于LB液體培養基中培養，加入IPTG誘導表達獲得重組嵌合蛋白。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述LB液體培養基中還添加0.02g/mL葡萄糖、1～5v/v％乙醇和2％甘油。

9.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，將陽性克隆接種于LB液體培養基中培養至OD₆₀₀＝0.5，加入IPTG至終濃度為0.5mM，在18℃下誘導表達重組嵌合蛋白。

10.權利要求1或2所述的重組嵌合蛋白在制備牛輪狀病毒疫苗中的應用。