[發明專利]一種發酵生產L-亮氨酸的方法

在審

• 申請號: 201410666558.3
• 申請日: 2014-11-20
• 公開（公告）號: CN104404095A
• 公開（公告）日: 2015-03-11
• 發明（設計）人: 劉帥;李靜;宋朋睿
• 申請（專利權）人: 河南巨龍生物工程股份有限公司
• 主分類號: C12P13/06
• 分類號: C12P13/06;C12R1/13
• 代理公司: 洛陽公信知識產權事務所(普通合伙) 41120
• 代理人: 時國珍

1.一種發酵生產L-亮氨酸的方法，其特征在于：包括以下步驟：

在搖瓶中裝入LB培養基，接入斜面菌種，然后將搖瓶置于搖床上在攪拌速度為110r/min，溫度為31℃條件下，培養28h，得到種子液，備用；然后按照10%接種量將種子液接入有發酵培養基的發酵罐中，并在溫度為31-32℃條件下進行發酵培養；

發酵過程中，通過控制攪拌轉速和風量，使發酵過程的前20h溶解氧為6-8mg/L，20h之后溶解氧為3-6mg/L；通過自動流加氨水控制發酵過程的pH，在菌體OD值達到25之前控制pH為6.4-6.7，菌體OD值增長到25后，pH每小時提高0.1，直至提高到7.2后保持不變；發酵結束后提取和精制L-亮氨酸，即完成L-亮氨酸的發酵生產。

2.如權利要求1所述的一種發酵生產L-亮氨酸的方法，其特征在于：所述的發酵培養基中包括以下質量百分數的含碳化合物和含氮化合物：無水葡萄糖0-3%、玉米漿3-6%、硫酸銨1-1.5%、醋酸銨0.7-1.0%、磷酸二氫鉀0.05-0.1%、硫酸鎂0.2-0.3%、蛋氨酸?0.04%、異亮氨酸?0.006%和谷氨酸?0.07%。

3.如權利要求1或2所述的一種發酵生產L-亮氨酸的方法，其特征在于：所述的發酵培養基中微量元素和維生素的添加量為VB₁?300ug/L、VH50?ug/L、FeSO₄?0.02-0.05mg/L、MnSO₄?0.01-0.03mg/L和ZnSO₄?0.02-0.05mg/L。

4.如權利要求1所述的一種發酵生產L-亮氨酸的方法，其特征在于：發酵過程中控制殘糖的質量百分數為0.005-0.05%。

5.如權利要求1所述的一種發酵生產L-亮氨酸的方法，其特征在于：所述的發酵培養基中，外加其重量0.3%的消泡劑。