[發(fā)明專利]一種低粘度、高純度酵母甘露聚糖的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410665920.5
• 申請日: 2014-11-19
• 公開（公告）號: CN104403017A
• 公開（公告）日: 2015-03-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王強(qiáng);劉紅芝;李亞楠;石愛民;劉麗;胡暉;林偉靜
• 申請（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 北京路浩知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君

1.一種低粘度、高純度酵母甘露聚糖的制備方法，其特征在于，所述制備方法具體包括如下步驟：

(1)以釀酒酵母細(xì)胞壁為原料，采用水提醇沉法，得到粗品酵母甘露聚糖；

(2)采用去離子水，將步驟(1)所得粗品酵母甘露聚糖配制成溶液；

(3)向步驟(2)所得溶液中加入中性蛋白酶，進(jìn)行酶解，酶解結(jié)束后，進(jìn)行滅酶，得粗品酵母甘露聚糖的一次酶解液；

(4)將步驟(3)所得的一次酶解液進(jìn)行離心處理；

(5)取步驟(4)所得上清，加入乙醇進(jìn)行醇沉，離心收集沉淀；

(6)取步驟(5)所得沉淀，加入磷酸鹽緩沖液配制成溶液，采用NaOH調(diào)節(jié)溶液pH值至7.5～8.0；

(7)取步驟(6)所得溶液，加入鏈霉蛋白酶，進(jìn)行酶解，酶解結(jié)束后，進(jìn)行滅酶，得粗品酵母甘露聚糖的二次酶解液；

(8)將步驟(7)所得二次酶解液進(jìn)行離心處理；

(9)取步驟(8)所得上清，加入乙醇進(jìn)行醇沉，離心收集沉淀；

(10)將步驟(9)所得沉淀采用去離子溶解，攪拌均勻至分散完全，將所述溶液采用超濾除鹽，收集所得截留液；

(11)將步驟(10)所得的截留液進(jìn)行噴霧干燥，即得低粘度、高純度酵母甘露聚糖。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(2)中，采用去離子水，將步驟(1)所得粗品酵母甘露聚糖配制成15％w/v的溶液。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(3)中，中性蛋白酶的添加量為粗品酵母甘露聚糖中蛋白含量的0.05％，酶解溫度為45℃，酶解時(shí)間為2h。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(4)中，離心轉(zhuǎn)速為4000～5000rpm，離心時(shí)間為5～10min。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(5)中，乙醇的用量為所得上清的二倍體積，離心轉(zhuǎn)速為4000～5000rpm，離心時(shí)間為10～20min。

6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(6)中，所述溶液濃度為15％w/v，磷酸鹽緩沖液的濃度為0.02M～0.2M，pH為7.0；NaOH濃度為0.01M。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(7)中，鏈霉蛋白酶的添加量為粗品酵母甘露聚糖中蛋白含量的0.05％，酶解溫度為40℃，酶解時(shí)間為8h。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(8)中，離心轉(zhuǎn)速為4000～5000rpm，離心時(shí)間為5～10min。

9.根據(jù)權(quán)利要求7或8所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(9)中，乙醇的用量為所得上清的三倍體積，離心轉(zhuǎn)速為4000～5000rpm，離心時(shí)間為10～20min。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(10)中，超濾采用的條件分別為分子量截留為10kDa的超濾膜、操作壓力為20～25psi、料液濃度為4％～6％、操作溫度為常溫。