[發(fā)明專利]一種用液相色譜法分離測(cè)定奧拉西坦及其中間體的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410664175.2
• 申請(qǐng)日: 2014-11-20
• 公開（公告）號(hào): CN104483400B
• 公開（公告）日: 2020-07-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王曉瑩;王宇杰;馬蘇峰
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 萬全萬特制藥（廈門）有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02
• 代理公司: 暫無信息
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本發(fā)明屬分析化學(xué)領(lǐng)域，本發(fā)明公開了一種用液相色譜法分離測(cè)定奧拉西坦及其中間體的方法，該方法以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料的色譜柱，以一定比例的離子對(duì)試劑?有機(jī)相為流動(dòng)相，可以定量測(cè)定奧拉西坦各中間體的含量，從而有效控制奧拉西坦的質(zhì)量。本發(fā)明方法專屬性強(qiáng)，準(zhǔn)確度高，操作簡便。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于分析化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及液相色譜法分離測(cè)定奧拉西坦及其中間體含量的方法。

背景技術(shù)

奧拉西坦是一種促進(jìn)學(xué)習(xí)，增強(qiáng)記憶力的新型中樞神經(jīng)系統(tǒng)藥物，該活性成分是一種合成的羥基氨基丁酸(BABOB)環(huán)狀衍生物，有激活、保護(hù)或促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞的功能恢復(fù)，改善智能障礙患者的記憶和學(xué)習(xí)的功能。而藥物本身沒有直接的血管活性，也沒有中樞興奮作用，對(duì)學(xué)習(xí)記憶能力的影響是一種持久的促進(jìn)作用。奧拉西坦，化學(xué)名為2-(4-羥基吡咯烷-2-酮-1-基)乙酰胺，英文通用名為Oxiracetam。分子式為C₆H₁₀N₂O₃。奧拉西坦結(jié)構(gòu)式為：

。

在該化合物的生產(chǎn)過程中，有幾個(gè)中間體可能會(huì)由于去除不完全而影響藥物的純度和質(zhì)量，對(duì)于奧拉西坦的生產(chǎn)質(zhì)量主要控制的中間體有4個(gè)，分別是氯乙酸甲酯（ICT-01）、S（-）-4-氯-3-羥基丁酸乙酯（ICT-02）、2-氨基乙酰胺（ICT-1）、4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酸乙酯（ICT-ZD），結(jié)構(gòu)式分別為：

。

對(duì)于奧拉西坦生產(chǎn)過程中引入的中間體，在原料藥中是需要進(jìn)行質(zhì)量控制的，因此，實(shí)現(xiàn)奧拉西坦及其中間體的分離，對(duì)奧拉西坦的質(zhì)量控制具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種分析奧拉西坦純度以及分離其中間體的方法，從而實(shí)現(xiàn)奧拉西坦與其中間體的分離和測(cè)定，從而保證奧拉西坦的純度，實(shí)現(xiàn)其終產(chǎn)品原料藥的質(zhì)量控制。

本發(fā)明所述的用液相色譜法分析奧拉西坦純度以及分離其中間體的方法，是采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料的色譜柱，以一定比例的離子對(duì)試劑溶液-有機(jī)相為流動(dòng)相。

上述所說的色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料的色譜柱，色譜柱品牌選自Apollo或者Kromasil。

上述所說的有機(jī)相選自以下化合物：甲醇、乙腈、丙醇、異丙醇、四氫呋喃等，優(yōu)選為甲醇。

上述所說的方法，其流動(dòng)相離子對(duì)試劑溶液-有機(jī)相采用等度洗脫。

上述所說的方法中，離子對(duì)選自庚烷磺酸鈉、辛烷磺酸鈉、戊烷磺酸鈉，優(yōu)選為庚烷磺酸鈉。

上述所說的方法中，其中離子對(duì)溶液中包含的離子對(duì)的濃度為0.01M～0.1M，優(yōu)選濃度為0.01M。

上述所說的方法中，離子對(duì)試劑溶液的pH為2.8，用稀磷酸調(diào)節(jié)pH值。

本發(fā)明所述的分離測(cè)定方法，可按照以下方法實(shí)現(xiàn)：

（1）取奧拉西坦樣品適量，用0.01M庚烷磺酸鈉溶液：甲醇=90:10溶解樣品，配制成每1mL含奧拉西坦0.1～1.5mg的樣品溶液。

（2）設(shè)置流動(dòng)相流速為0.5～1.5mL/min，流動(dòng)相流速優(yōu)選1.0mL/min，檢測(cè)波長為205～250nm，最佳檢測(cè)波長優(yōu)選205nm，柱溫箱溫度為15～40℃，柱溫箱溫度優(yōu)選20℃。

（3）取（1）的樣品溶液5～50μL，注入液相色譜儀，完成奧拉西坦與其中間體的分離測(cè)定。其中：

高效液相色譜儀的型號(hào)，無特別要求，本發(fā)明采用的色譜儀為島津：LC-20AT，CBM-20A，SIL-20AC，SPD-M20A，CTO-10ASvp