[發明專利]復合菌劑及所采用的復合微生物的連續發酵法

有效

• 申請號: 201410662273.2
• 申請日: 2014-11-19
• 公開（公告）號: CN104371960A
• 公開（公告）日: 2015-02-25
• 發明（設計）人: 劉金松;曾新福;楊彩梅;汪以真;馮杰
• 申請（專利權）人: 浙江惠嘉生物科技有限公司;浙江大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12R1/10;C12R1/125;C12R1/145
• 代理公司: 杭州中成專利事務所有限公司 33212
• 代理人: 金祺

1.復合微生物的連續發酵法，其特征是包括以下步驟：

1)、分別制備枯草芽孢桿菌菌液、地衣芽孢桿菌菌液和丁酸梭菌菌液；

2)、將發酵罐內加入15噸培養基Ⅲ作為基礎發酵液；

3)、控制基礎發酵液的溫度為36～38℃，控制罐壓0.01Mpa，投入140～160L的枯草芽孢桿菌液于36～38℃的溫度、750～850m³/h的通氣量、攪拌條件下發酵培養11～13h；

然后，投入140～160L的地衣芽孢桿菌菌液于36～38℃的溫度、750～850m³/h的通氣量、攪拌條件下繼續發酵培養15～17h；

接著，停止攪拌和通氣，于36～38℃的溫度下繼續發酵培養2h；

最后，投入140～160L的丁酸梭菌菌液于36～38℃的溫度靜置厭氧發酵培養23～25h；

4)、步驟3)所得的發酵液過濾后離心濃縮至原體積的28～32％；然后經噴霧干燥，得復合益生菌制劑。

2.根據權利要求1所述的復合微生物的連續發酵法，其特征是：

培養基Ⅲ的制備方法為：葡萄糖20g，玉米粉10g，大豆粉40g，酵母粉8g，1g硅油，碳酸氫鈣0.5g，氯化鈣0.015g，硫酸銨1g，硫酸鎂0.15g，硫酸錳0.15g，加水1000ml，用NaHCO₃調節pH至7.0，于121-128℃條件下消毒30-35min。

3.根據權利要求2所述的復合微生物的連續發酵法，其特征是：

枯草芽孢桿菌菌液的制備方法為：

將3.0ml的濃度為50×10⁸cfu/ml的枯草芽孢桿菌(保藏號：CGMCC?No.9383)菌液接種于1.9～2.1L的培養基Ⅰ中，于36～38℃搖床培養17～19h，然后投入280～320L的培養基Ⅲ于36～38℃、9～11m³/h的通氣量、攪拌條件下擴大培養培養17～19h；得枯草芽孢桿菌菌液；

地衣芽孢桿菌菌液的制備方法為：

將3.0ml的濃度為50×10⁸cfu/ml的地衣芽孢桿菌(保藏號：CGMCC?No.9385)菌液接種于1.9～2.1L的培養基Ⅰ中，于36～38℃搖床培養17～19h，然后投入280～320L的培養基Ⅲ于36～38℃、9～11m³/h的通氣量、攪拌條件下擴大培養17～19h；得地衣芽孢桿菌菌液；

丁酸梭菌菌液的制備方法為：

將3.0ml的濃度為2.0×10⁸cfu/ml的丁酸梭菌(保藏號：CGMCC?No.9386)菌液接種于1.9～2.1L的培養基Ⅱ中，于36～38℃靜置厭氧培養17～19h，然后投入280～320L的培養基Ⅲ于36～38℃靜置厭氧擴大培養17～19h，得丁酸梭菌菌液；

所述培養基Ⅰ為牛肉膏蛋白胨搖瓶培養基，所述培養基Ⅱ為RCM培養基。

4.根據權利要求3所述的復合微生物的連續發酵法，其特征是：

所述步驟4)中的過濾為經100目過濾；噴霧干燥的進風溫度210℃±5℃、出風口溫度95℃±5℃。

5.如權利要求1～4任一所述方法制備而得的復合益生菌制劑。