[發明專利]一種用于檢測大腸菌群的試劑盒及應用在審
| 申請號： | 201410660228.3 | 申請日： | 2014-11-18 |
| 公開（公告）號： | CN104404144A | 公開（公告）日： | 2015-03-11 |
| 發明（設計）人： | 胡雙芳;肖性龍;李蓉;余以剛;吳暉 | 申請（專利權）人： | 華南理工大學;中山出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12Q1/10;C12R1/19 |
| 代理公司： | 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245 | 代理人： | 蘇運貞;裘暉 |
| 地址： | 510640 廣*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 檢測 大腸菌 試劑盒 應用 | ||
1.一種用于檢測大腸菌群的試劑盒，其特征在于：包括引物序列和探針序列；其中：引物序列由上游引物F1130a、上游引物F1130b和下游引物R1264組成；探針序列為探針Pb1156A；
所述的上游引物F1130a的序列為如下所述的任一條序列：核心序列A；或以核心序列A為中心，向5’和3’端分別或同時延伸1～10個核苷酸得到的序列；
核心序列A：5’-TCCTGCTGATGAAGCAGAACAA-3’；
所述的上游引物F1130b的序列為如下所述的任一條序列：核心序列B；或以核心序列B為中心，向5’和3’端分別或同時延伸1～10個核苷酸得到的序列；
核心序列B：5’-ATATCGAACTCATGAAGCAGCATAA-3’；
所述的下游引物R1264的序列為如下所述的任一條序列：核心序列C；或以核心序列C為中心，分別或同時向5’端延伸1～10個核苷酸以及向3’端延伸1～2個核苷酸得到的序列；
核心序列C：5’-CCATGCCGTGGGTTTCAATAT-3’；
所述的探針Pb1156A的序列為如下所示的核心序列D；或以核心序列D為中心，分別或同時向5’端延伸1～2個核苷酸以及向3’端延伸1～10個核苷酸得到的序列；
核心序列D：5’-R-AACGCCGTGCGCTGYTCGCA-Q-3’，R為熒光報告基團，Q為熒光淬滅基團。
2.根據權利要求1所述的用于檢測大腸菌群的試劑盒，其特征在于：所述的上游引物F1130a的序列為核心序列A、向核心序列A的5’端延伸10個核苷酸得到的序列或向核心序列A的3’端延伸10個核苷酸得到的序列。
3.根據權利要求1所述的用于檢測大腸菌群的試劑盒，其特征在于：所述的上游引物F1130b的序列為核心序列B、向核心序列B的5’端延伸10個核苷酸得到的序列或向核心序列B的3’端延伸10個核苷酸得到的序列。
4.根據權利要求1所述的用于檢測大腸菌群的試劑盒，其特征在于：所述的下游引物R1264的序列為核心序列C、向核心序列C的5’端延伸10個核苷酸得到的序列或向核心序列C的3’端延伸2個核苷酸得到的序列。
5.根據權利要求1所述的用于檢測大腸菌群的試劑盒，其特征在于：所述的探針Pb1156A的序列為核心序列D、向核心序列D的5’端延伸2個核苷酸得到的序列或向核心序列D的3’端延伸10個核苷酸得到的序列。
6.根據權利要求1所述的用于檢測大腸菌群的試劑盒，其特征在于：所述的熒光報告基團為FAM、HEX或TET。
7.根據權利要求1所述的用于檢測大腸菌群的試劑盒，其特征在于：所述的熒光淬滅基團為TAMRA或BHQ1。
8.根據權利要求1所述的用于檢測大腸菌群的試劑盒，其特征在于：所述的核心序列D為5'-HEX-AACGCCGTGCGCTGYTCGCA-BHQ1-3'。
9.權利要求1～8任一項所述的用于檢測大腸菌群的試劑盒，其特征在于：還包含用于熒光定量PCR的酶和試劑。
10.權利要求1～9任一項所述用于檢測大腸菌群的試劑盒在食品領域中進行應用。
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