[發明專利]黃酮類化合物在制備抗乙肝病毒藥物中的用途

在審

• 申請號: 201410657691.2
• 申請日: 2014-11-18
• 公開（公告）號: CN105640933A
• 公開（公告）日: 2016-06-08
• 發明（設計）人: 陳道峰;殷翔;史訓龍;朱海燕;盧燕
• 申請（專利權）人: 復旦大學
• 主分類號: A61K31/352
• 分類號: A61K31/352;A61K31/7048;A61P31/20
• 代理公司: 上海元一成知識產權代理事務所(普通合伙) 31268
• 代理人: 吳桂琴

技術領域

本發明屬于醫藥領域，涉及從藥用植物山芝麻中分離得到的黃酮類化合物在 制備抗乙肝病毒藥物中的用途。

背景技術

據有關統計顯示，全世界大約有3億多人為慢性乙肝病毒(HBV)攜帶者， 我國約占半數。乙肝病毒感染已成為全球性的影響人類健康的主要疾病之一，由 于HBV感染可以導致慢性肝炎、肝硬化和原發性肝癌，因此成為影響人類壽命 的九大疾病之一。由于慢性HBV感染者較非攜帶者發生肝癌的相對危險率為 217，因此在全世界每年大約有200萬人死于乙肝引起的肝硬化和肝癌，而我國 又是乙型肝炎的高發區，每年約有25萬人死于與乙肝相關的慢性肝病(肝硬化 與肝癌)。上述疾病給人民健康和國民經濟帶來巨大損失。因此，尋求高效低毒 的抗HBV藥物已成為刻不容緩的問題。

藥物化學工作者在篩選抗HBV藥物的過程中進行了不懈的努力，但到目前 為止能治愈HBV感染的特效藥還在尋找。臨床上已獲得FDA正式批準使用的 α-干擾素和核苷類藥物拉米呋啶只能在某種程度上獲得治療效果，對大多數病人 還達不到治愈的目的，停止治療后的“反跳”現象是醫藥工作者最感棘手的問題， 所以開發研制高效、低毒、不“反跳”的抗HBV新藥向藥物化學工作者提出了挑 戰。在篩選抗HBV新藥的過程中，越來越多的藥物化學工作者把注意力轉向了 植物來源豐富、價廉易得、毒副作用小、分子結構復雜多樣的天然化合物。

山芝麻(HelicteresangustifoliaL.)為梧桐科植物，主要分布于嶺南地區， 其根或全株藥用，具有解表清熱、消腫解毒的功能,常用于治療感冒發熱、肺熱 咳嗽、咽喉腫痛、頭痛、腸炎、癰腫等癥，在涼茶配方中也常出現。藥理研究表 明山芝麻具有抗菌、抗炎、抗病毒及抗腫瘤等活性。我們的研究表明山芝麻粗提 物具有很好的抗HBV活性，但對其抗HBV的藥效物質卻缺乏研究，而本發明 涉及的黃酮類化合物尚未見抗HBV活性報道。

發明內容

本發明的目的是提供從山芝麻中分離得到的黃酮類化合物在制備抗乙肝病 毒藥物中的用途。

本發明應用現代藥理篩選方法，從梧桐科山芝麻屬(Helicteres)植物山芝麻 (H.angustifolia)中提取分離得到黃酮類化合物：5,7,8-三羥基-4'-甲氧基黃酮(1) 和翻白葉苷A(2)，并經試驗證實所述化合物具有抗HBV活性。

本發明所述的活性化合物具有如下的化學結構：

本發明中，

化合物5,7,8-三羥基-4'-甲氧基黃酮(1)，其中，R₁＝OH,R₂＝H,R₃＝OCH₃；

化合物翻白葉苷A(2),其中，R₁＝H,R₂＝OA,R₃＝OH，且取代基R2中的基團 A為:

本發明的化合物通過下述方法制備：

取山芝麻干燥地上部分15kg，95％乙醇回流提取，濃縮后分別用石油醚、 乙酸乙酯和正丁醇萃取，共得1.05kg，取乙酸乙酯萃取物160g進行硅膠柱色譜， 以二氯甲烷-甲醇梯度洗脫，所得流份以不同洗脫劑進行反復硅膠柱色譜、MPLC 和SephadexLH-20凝膠柱色譜等分離純化手段分離得到化合物5,7,8-三羥基-4'- 甲氧基黃酮(1)和翻白葉苷A(2)。

本發明所述的黃酮類化合物5,7,8-三羥基-4'-甲氧基黃酮(1)和翻白葉苷A(2) 進行了體外抗HBV實驗，結果證實，所述化合物具有顯著的抗HBV活性，且 有效濃度低，其中5,7,8-三羥基-4'-甲氧基黃酮(1)對HBsAg的IC₅₀值為49.3μg/ml， 對HBeAg的IC₅₀值為68.4μg/ml；翻白葉苷A(2)對HBsAg的IC₅₀值為14.6 μg/ml，對HBeAg的IC₅₀值為41.5μg/ml,顯著高于陽性對照拉米呋啶；所述化 合物可作為活性成分用于制備抗HBV的藥物。

具體實施方式

實施例1提取、分離、制得黃酮類化合物