[發明專利]一種用于香水椰子種苗純度的鑒定的特異SSR引物及鑒定方法有效
| 申請號： | 201410657128.5 | 申請日： | 2014-11-18 |
| 公開（公告）號： | CN104480197A | 公開（公告）日： | 2015-04-01 |
| 發明（設計）人： | 楊耀東;吳翼;沈雁;肖勇;夏薇;李靜;周立霞 | 申請（專利權）人： | 中國熱帶農業科學院椰子研究所 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京聯瑞聯豐知識產權代理事務所(普通合伙) 11411 | 代理人： | 朱廣存 |
| 地址： | 571339 *** | 國省代碼： | 海南;66 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 香水 椰子 種苗 純度 鑒定 特異 ssr 引物 方法 | ||
1.一種用于香水椰子種苗純度的鑒定的特異SSR引物，其特征在于：所述的特異SSR引物序列為，左引物序列為(5'to3')TGAAAACAAAAGATAGATGTCAG，右引物序列為(5'to3')GAAGATGCTTTGATATGGAAC。
2.一種香水椰子種苗純度的鑒定方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)香水椰子種苗葉片DNA的提取；
(2)利用特異SSR引物進行PCR擴增；
(3)PCR擴增產物經聚丙烯酰胺凝膠電泳分離條帶；
(4)步驟(3)所得的電泳凝膠進行染色，拍照，即可根據條帶情況將具有香味的香水椰子種苗鑒定出來。
3.根據權利要求2所述的一種香水椰子種苗純度的鑒定方法，其特征在于：所述步驟(1)香水椰子種苗葉片DNA提取采用改良的CTAB法。
4.根據權利要求2所述的一種香水椰子種苗純度的鑒定方法，其特征在于，步驟(1)所述改良的CTAB法，具體操作為：在提取緩沖液和裂解緩沖液中同時加入PVP40和β-巰基乙醇，在提取過程中，利用氯仿-異戊醇進行2-3次抽提。
5.根據權利要求2所述的一種香水椰子種苗純度的鑒定方法，其特征在于：所述步驟(2)PCR擴增程序為94-96℃預變性1-3min進入擴增循環；94-96℃變性20-40s，50-60℃退火40-50s，70-75℃延伸1min；重復循環25-35次，72℃延伸5-10min。
6.根據權利要求2所述的一種香水椰子種苗純度的鑒定方法，其特征在于：步驟(2)所述的特異SSR引物具有如權利要求1所述的序列。
7.根據權利要求2所述的一種香水椰子種苗純度的鑒定方法，其特征在于：所述步驟(4)染色用試劑為硝酸銀。
8.根據權利要求2所述的一種香水椰子種苗純度的鑒定方法，其特征在于：所述步驟(4)電泳凝膠上條帶顯示為2條的香水椰子種苗所結的椰果具有香味，電泳凝膠上條帶顯示為3條的香水椰子種苗所結的椰果不具有香味。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于中國熱帶農業科學院椰子研究所，未經中國熱帶農業科學院椰子研究所許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201410657128.5/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
