[發(fā)明專利]一種采用液相色譜法測定阿普斯特及其制劑中雜質(zhì)的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410653684.5
• 申請日: 2014-11-18
• 公開（公告）號: CN105588886B
• 公開（公告）日: 2020-01-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 熊娟;代廣會;萬娟;張道林
• 申請（專利權(quán)）人: 重慶醫(yī)藥工業(yè)研究院有限責(zé)任公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種采用液相色譜法測定阿普斯特及其制劑中雜質(zhì)的方法，包括：

a）采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料的色譜柱；

b）以緩沖溶液為流動相A，甲醇與乙腈的混合溶劑為流動相B；

c）流動相采用梯度洗脫方法，流速為0.8ml/min～1.2ml/min，用紫外檢測器進(jìn)行檢測；

其中，所述緩沖溶液為磷酸、磷酸鹽溶液或它們的混合物，甲醇與乙腈的體積比為60：40至40：60；所述雜質(zhì)選自下列化合物中一種或多種：4-氨基-2-[1-（3-乙氧基-4-甲氧基苯基）-2-（甲基磺酰基）乙基]-1H-異吲哚-1,3（2H）-二酮、3-乙酰基鄰苯二甲酸、N-{2-[1-（3-乙氧基-4-羥基苯基）-2-（甲基磺酰基）乙基]-1,3-二氧代異吲哚啉-4-基}乙酰胺、N-{2-[1-（3-乙氧基-4-羥基苯基）-2-（甲基磺酰基）乙基]-1,3-二氧代異吲哚啉-5-基}乙酰胺、N-{2-[1-（3-乙氧基-4-甲氧基苯基）-2-（甲基磺酰基）乙基]-1,3-二氧代異吲哚啉-4-基}-2-羥基乙酰胺、3-硝基鄰苯二甲酸、（S）-1-（3-乙氧基-4-甲氧基苯基）-2-(甲基磺酰基)乙胺，N-乙酰基-L-亮氨酸鹽和3-氨基鄰苯二甲酸。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，所述緩沖溶液為磷酸二氫鉀、磷酸二氫鈉、磷酸二氫銨、磷酸氫二鉀、磷酸氫二鈉、磷酸氫二銨或它們的混合磷酸鹽溶液。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，所述磷酸鹽為磷酸二氫鉀。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的方法，所述緩沖溶液的濃度為0.0001mol/L至1mol/L。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，所述緩沖溶液的濃度為0.001mol/L至0.1mol/L。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，所說的緩沖溶液用磷酸溶液調(diào)節(jié)pH為2.0至2.4。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，所述梯度洗脫方法為：0分鐘，流動相A為95%～80%，流動相B為5%～20%；0分鐘至8分鐘，流動相A線性減少至80%～60%，流動相B線性增加至20%～40%；8分鐘至40分鐘，流動相A線性減少至20%～0%，流動相B線性增加至80%～100%；40分鐘至50分鐘，流動相A為20%～0%，流動相B為80%～100%；50分鐘至53分鐘，流動相A線性增加至95%～80%，流動相B線性減少至5%～20%；53分鐘至60分鐘，流動相A為95%～80%，流動相B為5%～20%；即50分鐘后為平衡色譜柱，流動相A和流動相B均為體積百分比。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，還包含以下步驟：

a)供試品溶液的配制：取阿普斯特或含阿普斯特的制劑適量，加稀釋劑溶解樣品，并配制成每1ml含阿普斯特0.5至10mg的樣品溶液作為供試品溶液；

b)對照溶液的配制：精密量取阿普斯特對照品適量，加稀釋劑制成濃度為供試品溶液濃度0.1%～2.0%的溶液，作為對照溶液；

設(shè)置流動相的流速為0.8～1.2ml/min；設(shè)置檢測波長為200nm至250nm；設(shè)置色譜柱的柱溫為15°C至40°C；設(shè)置進(jìn)樣量為5μl至100μl；分別精密量取等體積的供試品溶液與對照溶液，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，完成供試品溶液有關(guān)物質(zhì)的分離測定；

其中，所述稀釋劑為乙腈和水的混合溶液，乙腈與水的體積比為5：95～30：70。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，流動相的流速為1.0ml/min，檢測波長為230nm，色譜柱的柱溫為25℃，進(jìn)樣量為20μl，乙腈與水的體積比為20:80 。