[發明專利]一種重組表達葡萄糖氧化酶的解脂耶氏酵母及其應用在審
| 申請號： | 201410653076.4 | 申請日： | 2014-11-17 |
| 公開（公告）號： | CN104357343A | 公開（公告）日： | 2015-02-18 |
| 發明（設計）人： | 陳堅;劉曉筱;張娟;堵國成;顧磊 | 申請（專利權）人： | 江南大學 |
| 主分類號： | C12N1/19 | 分類號： | C12N1/19;C12N15/81;C12N9/04;C12R1/645 |
| 代理公司： | 北京愛普納杰專利代理事務所(特殊普通合伙) 11419 | 代理人： | 張勇 |
| 地址： | 214122 江蘇*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 重組 表達 葡萄糖 氧化酶 解脂耶氏 酵母 及其 應用 | ||
1.一株能夠高產葡萄糖氧化酶的解脂耶氏酵母重組菌，其特征在于，是以解脂耶氏酵母Po1h為宿主，以pINA1297為載體表達編碼葡萄糖氧化酶的基因。
2.根據權利要求1所述的重組菌，其特征在于，所述葡萄糖氧化酶基因來源黑曲霉Aspergillus?niger?CCTCC?NO：M2011291。
3.根據權利要求1所述的重組菌，其特征在于，所述葡萄糖氧化酶基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。
4.一種構建權利要求1所述解脂耶氏酵母重組菌的方法，其特征在于，主要包括以下步驟：(1)構建重組表達載體pINA1297-GOD；(2)醋酸鋰法轉化解脂耶氏酵母Po1h；(3)篩選驗證重組菌株。
5.權利要求1所述解脂耶氏酵母重組菌在葡萄糖氧化酶生產中的應用方法。
6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，是將重組菌接種到種子液體培養基YPD中，培養24h后以10％的接種量轉接至發酵培養基PPB中，于28℃、200r/min搖床中培養168h。
7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述YPD培養基按g/L計含有：葡萄糖20；蛋白胨20；酵母粉10。
8.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述PPB培養基按g/L計含有：蔗糖20，酵母提取物1.32，氯化銨1.32，磷酸二氫鉀0.32，無水硫酸鎂0.132，維生素B1?3.34×10-4；溶于pH?6.0的檸檬酸鹽緩沖液中。
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