[發明專利]一種從核桃青皮中分離制備生物堿的方法

有效

• 申請號: 201410650315.0
• 申請日: 2014-11-08
• 公開（公告）號: CN104478878A
• 公開（公告）日: 2015-04-01
• 發明（設計）人: 楊衛民;張蘇勤;杜京旗;趙君;劉寶琦
• 申請（專利權）人: 呂梁學院
• 主分類號: C07D471/22
• 分類號: C07D471/22;C07D451/10;C07D221/22;C07D455/03;C07D311/62;C07C65/03;C07C51/47;C07C51/42
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1.一種從核桃青皮中分離制備生物堿的方法，其特征在于，以核桃青皮為原料，經超聲波微波萃取儀輔助處理后，采用多級萃取和HSCCC對生物堿進行分離和制備，其中，用甲醇：水比例為4∶1的混合液作提取劑，液料比為10∶1，經超聲波微波萃取儀輔助處理15min后，采用多級萃取后獲得氯仿甲醇水生物堿提取液；用氯仿甲醇。

2.根據權利要求1所述的從核桃青皮中分離制備生物堿的方法，其特征在于，該具體過程為：

步驟a，以胡桃青皮為原料，加入10倍體積的甲醇：水為4∶1的混合液，在超聲波微波輔助萃取儀分三階段進行處理，超聲波頻率為50KHz，模式15∶10，電機轉速900r·min^-1；

離心取上清液，旋轉蒸發器蒸發至原體積的1/10，用2mol·L^-1H₂SO₄酸化至PH為2～3，氯仿萃取3次，將上層酸水溶液層用氨水堿化至PH為10左右，用氯仿：甲醇比例為3∶1的混合液萃取2次，再用氯仿萃取1次，取氯仿：甲醇的提取液；

旋轉蒸發，留取少許用坩堝蒸干，計算提取率后用甲醇溶解；

步驟b，薄層層析分離生物堿；稱取羧甲基纖維素鈉加適量的純水溶解，加薄層層析硅膠，混勻后再加微晶纖維素，超聲波清洗除氣泡，圖板制片，備用；

用氯仿：甲醇比例為16∶1的混合液作展開劑；

步驟c，HSCCC分離制備生物堿，以甲醇作對照，對核桃青皮生物堿樣品和6種標準生物堿；在190-400nm處用紫外可見光度計進行檢測，觀察吸收峰值，并導出波峰數據；

石油醚：氯仿：甲醇：2mol·L^-1H₂SO₄比例為2∶4∶2∶2V/V為溶劑體系，按比例將4種溶劑加入分液漏斗中，震蕩使溶液充分混合，室溫下靜置過夜，使用前分得上相和下相，超聲脫氣30min以備用；

將已超聲脫氣后的下相以20mL·min^-1的速度泵入HSCCC分離管中，待下相充滿整個管路，設定分離管順時針旋轉，緩慢調節主機轉數至800r·min^-1，同時以2mL·min^-1流速注入上相，兩相達平衡后由進樣閥進入樣品溶液，同時采集相應的數據，通過紫外檢測檢測流出物，按照色譜峰收集相應的成份。