[發明專利]藍靛果忍冬器官型再生培養方法

在審

• 申請號: 201410649128.0
• 申請日: 2014-11-17
• 公開（公告）號: CN104429948A
• 公開（公告）日: 2015-03-25
• 發明（設計）人: 李黎;曲彥婷;張悅;陳菲;唐煥偉;韓輝;何丹嬈;周麗萍;佟斌;宮偉;曲線;熊燕
• 申請（專利權）人: 黑龍江省科學院自然與生態研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域：本發明涉及一種藍靛果忍冬器官型再生培養方法。

背景技術

藍靛果忍冬(Lonicera?caerulea)是忍冬科(Caprifoliaceae)忍冬屬落葉灌木，高1.3～1.5m，主要分布在俄羅斯、中國、日本和北美。北日勒(Берель)是西伯利亞科學院理薩文科園藝研究所1980年從阿爾泰忍冬與勘察加忍冬的藍鳥、藍色紡錘、蔚藍等品種的雜交種中選出的新品種，1996年被列入俄羅斯國家登記冊。果實為小漿果，平均單果重1.3～1.6g，果汁多，味酸甜，含糖7.2％、酸2.8％，每100g鮮果含維生素C?23mg，維生素P?1263mg，果實較硬，耐貯運，是可綜合利用的品種。果實適合鮮食以及用來加工成果汁、果酒、飲料等，也是加工天然食用色素的極好原料，具有很高的營養價值和保健功能，國際公認為是繼越桔、黑穗醋栗、樹莓和沙棘之后的又一新興小漿果樹種。藍靛果忍冬中存在豐富的生理活性物質，對于治療目前人類的許多常見疾病都有重大價值，因此，在食品和醫療保健品的開發上都具有重要的經濟意義。

近年來，隨著市場需求的不斷增長，鮮果價格不斷提高，加之對?藍靛果飲料、果酒等產品的開發，導致其野生資源銳減，市場供不應求。我國從20世紀80年代開展了野生藍靛果的馴化栽培試驗以及開發利用工作，但新品種選育及定量化的培育試驗工作才剛剛開始，因此開展優良品種組織培養技術研究尤為重要。

國內外關于藍靛果忍冬組織培養與快速繁殖的報道很少，現有報道中對俄羅斯引進品種組織培養與植株再生的研究也是通過愈傷組織的器官發生型途徑，尚沒有不經過愈傷組織，直接從外植體上再生不定芽，縮短組織培養周期的相關報道?，F有的藍靛果忍冬組織培養方法，培養周期長，本發明采用器官型再生培養方法，與現有的由外植體誘導愈傷組織，通過愈傷組織再分化不定芽的器官發生型培養方法相比，減少了由外植體誘導愈傷組織的過程，直接從外植體上再生不定芽，縮短了組織培養的培養周期，節約了組織培養成本，加快了繁殖途徑，并且形成的不定芽保持了原品種的優良特性。

發明內容：本發明的目的是提供一種藍靛果忍冬器官型再生培養方法，改變現有藍靛果忍冬組織培養由外植體誘導愈傷組織，通過愈傷組織再分化不定芽的器官發生型的培養方法，簡化現有藍靛果忍冬組織培養的環節，縮短培養周期，節約培養成本。本發明的技術方案為：

一種藍靛果忍冬器官型再生培養方法，其特征是：由以下四個步?驟組成：

第一步、外植體滅菌

藍靛果忍冬外植體接種至器官型再生培養基之前，外植體采集在6月初進行，外植體應選用定植后一年生或兩年生植株新梢的莖尖或莖段，將采集的外植體放入清水中浸泡，加入少量洗衣粉浸泡攪拌2～3min，然后放入流水沖洗4～6h，于超凈工作臺上用體積百分比濃度為75％的酒精浸泡30s，無菌水沖洗3次，再用質量百分比濃度為0.1％的氯化汞溶液消毒8～10min，然后用無菌水沖洗6～7次，再接種于器官型再生培養基上；

第二步、基本培養基