[發(fā)明專利]藍靛果忍冬器官型再生培養(yǎng)方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201410649128.0 | 申請日： | 2014-11-17 |
| 公開（公告）號： | CN104429948A | 公開（公告）日： | 2015-03-25 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 李黎;曲彥婷;張悅;陳菲;唐煥偉;韓輝;何丹嬈;周麗萍;佟斌;宮偉;曲線;熊燕 | 申請（專利權(quán)）人： | 黑龍江省科學(xué)院自然與生態(tài)研究所 |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 150040 黑龍*** | 國省代碼： | 黑龍江;23 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 藍靛 忍冬 器官 再生 培養(yǎng) 方法 | ||
1.一種藍靛果忍冬器官型再生培養(yǎng)方法，其特征是：由以下四個步驟組成：
第一步、外植體滅菌
藍靛果忍冬外植體接種至器官型再生培養(yǎng)基之前，外植體采集在6月初進行，外植體應(yīng)選用定植后一年生或兩年生植株新梢的莖尖或莖段，將采集的外植體放入清水中浸泡，加入少量洗衣粉浸泡攪拌2～3min，然后放入流水沖洗4～6h，于超凈工作臺上用體積百分比濃度為75％的酒精浸泡30s，無菌水沖洗3次，再用質(zhì)量百分比濃度為0.1％的氯化汞溶液消毒8～10min，然后用無菌水沖洗6～7次，再接種于器官型再生培養(yǎng)基上；
第二步、基本培養(yǎng)基
藍靛果忍冬器官型再生培養(yǎng)基，采用B5混合培養(yǎng)基作為藍靛果忍冬器官型再生培養(yǎng)基，基本培養(yǎng)基由大量元素、微量元素組成，為保證鐵元素的穩(wěn)定供應(yīng)，采用Fe·EDTA形態(tài)的鐵鹽，未采用B5鐵鹽成分，其中大量元素由質(zhì)量百分比濃度為2500mg/L的硝酸鉀(KNO3)，150mg/L的氯化鈣(CaCl2·2H2O)，250mg/L的硫酸鎂(MgSO4·7H2O)，134mg/L的硫酸銨【(NH4)2SO4】，150mg/L的磷酸二氫鈉(NaH2PO4·H2O)組成，微量元素由質(zhì)量百分比濃度為10mg/L的硫酸錳(MnSO4·H2O)，3mg/L的硼酸(H3BO3)，2mg/L的硫酸鋅(ZnSO4·7H2O)，0.75mg/L的碘化鉀(KI)，0.25mg/L的鉬酸鈉(Na2MoO4·2H2O)，0.025mg/L的硫酸銅(CuSO4·5H2O)，0.025mg/L的氯化鈷(CoCl2·6H2O)組成，鐵鹽由質(zhì)量百分比濃度為27.8mg/L的硫酸亞鐵(FeSO4·7H2O)和質(zhì)量百分比濃度為37.3mg/L的乙二胺四乙酸二鈉(Na2·EDTA·2H2O)的螯合劑(NaFe·EDTA)組成，蔗糖30g/L，瓊脂粉5～6g/L，pH值5.8～6.2；
第三步、附加激素
藍靛果忍冬器官型再生培養(yǎng)基附加激素，由質(zhì)量百分比濃度為1.0～3.0mg/L的6-芐基氨基嘌呤(6BA)和質(zhì)量百分比濃度為0.1～0.3mg/L的吲哚丁酸(IBA)組成；
第四步、培養(yǎng)條件
藍靛果忍冬器官型再生培養(yǎng)方法的培養(yǎng)條件是：培養(yǎng)溫度白天為23℃±2℃，夜間不低于15℃，光照時間為12～14h/d，光照強度為1800～2000Lx，30～35天繼代一次。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種藍靛果忍冬器官型再生培養(yǎng)方法，其特征是：所述的藍靛果忍冬器官型再生培養(yǎng)基附加激素由質(zhì)量百分比濃度為2.0mg/L的6-芐基氨基嘌呤(6BA)和質(zhì)量百分比濃度為0.3mg/L的吲哚丁酸(IBA)組成，外植體不形成愈傷組織，直接再生不定芽，且分化率達到100％。
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