[發明專利]一種抗氧化多肽及其制備方法與應用

在審

• 申請號: 201410645383.8
• 申請日: 2014-11-12
• 公開（公告）號: CN104356203A
• 公開（公告）日: 2015-02-18
• 發明（設計）人: 羅永康;尤娟
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K1/16;C12P21/06;A23L1/305
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君

1.一種抗氧化多肽，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列為Tyr-Thr-Ile-Gln-Tyr。

2.權利要求1所述抗氧化多肽的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)以鰱魚魚肉為原料，加水混合，于80～90℃水浴中靜置15～20min，勻漿，得到魚肉勻漿液；

2)在步驟1)所得魚肉勻漿液中加入胃蛋白酶進行酶解，充分反應后，在95～100℃下保溫3～5min，冷卻至室溫，離心，收集上清液；

3)取步驟2)所得上清液，用孔徑為2500-3000道爾頓陶瓷膜進行超濾，得到含有所述抗氧化多肽的多肽溶液。

3.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟1)所述勻漿具體為：在10000～13000rpm條件下勻漿1～3min。

4.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟2)所述酶解具體為：在pH?1.8～2.5、35～40℃的條件下反應0.25～2.0h。

5.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟2)所述離心具體為：在4000～6000g條件下離心5～10min。

6.根據權利要求2～5任意一項所述的制備方法，其特征在于，還包括對步驟3)所得多肽溶液進行純化，純化產物經濃縮、冷凍干燥后，即得抗氧化多肽。

7.根據權利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述純化包括以下步驟：使用Sephadex?G-25凝膠色譜柱，以去離子水為流動相進行洗脫，收集含有所述抗氧化多肽的洗脫液。

8.根據權利要求7所述的制備方法，其特征在于，所述純化還包括以下步驟：使用十八烷基鍵合硅膠色譜柱，以含有0.1％三氟乙酸的乙腈-水為流動相進行洗脫，收集含有所述抗氧化多肽的洗脫液。

9.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)取鰱魚魚肉，加入1～3倍于魚肉重量的水，于80～90℃水浴中靜置15～20min，在10000～13000rpm條件下勻漿1～3min，得到魚肉勻漿液；

2)在步驟1)所得魚肉勻漿液中加入胃蛋白酶，所述胃蛋白酶與步驟1)所述鰱魚魚肉的質量比為1：100～300，在pH?1.8～2.5、35～40℃的條件下進行酶解，反應0.25～2.0h后，在95～100℃下保溫3～5min，冷卻至室溫，在4000～6000g條件下離心5～10min，收集上清液；

3)取步驟2)所得上清液，利用孔徑為2500-3000道爾頓陶瓷膜進行超濾，得到多肽溶液；

4)取步驟3)所得多肽溶液，濃縮，使用Sephadex?G-25凝膠色譜柱，以去離子水為流動相進行洗脫，收集含有所述抗氧化多肽的洗脫液；

5)取步驟4)所得洗脫液，濃縮，使用十八烷基鍵合硅膠色譜柱，以含有0.1％三氟乙酸的乙腈-水為流動相進行洗脫，收集含有所述抗氧化多肽的洗脫液；濃縮，冷凍干燥，即得抗氧化多肽。

10.權利要求1所述抗氧化多肽或由權利要求2～9任意一項所述制備方法得到的抗氧化多肽的應用。