[發明專利]一種HtrA2融合基因及其應用有效
| 申請號： | 201410644113.5 | 申請日： | 2014-11-14 |
| 公開（公告）號： | CN104357470A | 公開（公告）日： | 2015-02-18 |
| 發明（設計）人： | 姜長安;張婷;胡袁 | 申請（專利權）人： | 四川大學華西第二醫院 |
| 主分類號： | C12N15/62 | 分類號： | C12N15/62;C12N15/10;A61K48/00;A61P25/28;A61P25/16;A61P25/00 |
| 代理公司： | 成都天嘉專利事務所(普通合伙) 51211 | 代理人： | 鄒翠 |
| 地址： | 610000 四川*** | 國省代碼： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 htra2 融合 基因 及其 應用 | ||
1.一種HtrA2融合基因，其特征在于：該HtrA2融合基因的DNA序列為SEQID?NO:1。
2.根據權利要求1所述的一種HtrA2融合基因，其特征在于：該HtrA2融合基因構建的具體步驟如下：
1）用含有Acc65I位點的引物1和含有BamHI位點的引物2?PCR擴增出人類線粒體外膜蛋白USP30?cDNA中的USP30(1-201)片段；
2）用含有BglII位點的引物3和XbaI位點的引物4，PCR擴增蛋白酶HtrA2?cDNA中的HtrA2(400-1374)片段；
3）用限制性內切酶Acc65I和BamHI對USP30(1-201)片段進行酶切，用BglII和XbaI對HtrA2(400-1374)片段進行酶切；
4）通過瓊脂糖凝膠電泳純化、回收酶切后的片段；
5）將回收的USP30(1-201)和HtrA2(400-1374)片段同時連接到經Acc65I和XbaI酶切處理的基因表達載體中，得到由USP30(1-201)和HtrA2(400-1374)?連接而成的HtrA2融合基因。
3.根據權利要求2所述的一種HtrA2融合基因，其特征在于：
所述引物1的DNA序列為：
5’-GATC?GGTACC?GCCACC?ATG?ACC?GCC?GCC?GAC?AGG?GCC-3’
所述引物2的DNA序列為：
5’-GATC?GGATCC?CAC?AAG?CCC?TTT?TCT?ACG?CTT-3’
所述引物3的DNA序列為：
5’-GATC?AGATCT?GGG?GGT?CGG?GGT?CCT?CCG?GCC-3’?
所述引物4的DNA序列為：
5’-GATC?TCTAGA?TTC?TGT?GAC?CTC?AGG?GGT?CAC-3’。
4.根據權利要求1所述的一種HtrA2融合基因的應用，其特征在于：該HtrA2融合基因在防治由線粒體受損引起的病癥中的應用。
5.根據權利要求4所述的一種HtrA2融合基因的應用，其特征在于：所述的病癥為退行性神經疾病。
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