[發(fā)明專利]一種制備阿肽地爾的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410643586.3
• 申請(qǐng)日: 2014-11-14
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104447963B
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-11-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊東暉;路楊;周亮
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 杭州阿諾生物醫(yī)藥科技股份有限公司
• 主分類號(hào): C07K14/00
• 分類號(hào): C07K14/00;C07K1/06;C07K1/04;C07K1/02
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于多肽藥物制備方法技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種制備阿肽地爾的方法。

背景技術(shù)

阿肽地爾，英名為：Aviptadil。

所述阿肽地爾的肽序如下：

H-His-Ser-Asp-Ala-Val-Phe-Thr-Asp-Asn-Tyr-Thr-Arg-Leu-Arg-Lys-Gln-Met-Ala-Val-Lys-Lys-Tyr-Leu-Asn-Ser-Ile-Leu-Asn-NH₂

阿肽地爾為Mondobiotech AG和Biogen Idec公司開(kāi)發(fā)出來(lái)，是由28個(gè)氨基酸組成的線性肽。主要用于急性呼吸窘迫綜合癥和特發(fā)性肺纖維化治療，其效果較好且副作用小，是一種很有市場(chǎng)前景的多肽藥物。

目前阿肽地爾常規(guī)合成方法為逐個(gè)偶聯(lián)方法，合成效率低下，偶聯(lián)組氨酸容易消旋；另外CN201310100852.3報(bào)道了采用Boc-His(3-Bum)-Ser(Psi(Me,Me)pro)-OH假二肽片段法偶聯(lián)，雖然可以一定程度上減少組氨酸消旋，提高純度和收率，但是此假二肽價(jià)格昂貴，不適合大規(guī)模生產(chǎn)。

綜上所述，目前阿肽地爾的制備的不足有：合成效率低下，降低組氨酸消旋的成本高，不適合大規(guī)模生產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明為解決上述技術(shù)問(wèn)題從而提供一種制備阿肽地爾的方法，該方法使用Fmoc-Leu-Asn-OH二肽片段偶聯(lián)23、24位和27、28位氨基酸，而第1位組氨酸偶聯(lián)采用Boc-His(Trt)-OH。本發(fā)明提供了一種合成效率高、成本低、同時(shí)還能避免消旋雜質(zhì)D-His¹-阿肽地爾，適合規(guī)模化生產(chǎn)的阿肽地爾的合成工藝。

本發(fā)明的合成路線如圖1所示：首先通過(guò)液相法合成二肽片段Fmoc-Leu-Asn-OH；然后采用固相合成法，以Rink Amide MBHA氨基樹(shù)脂為起始樹(shù)脂，按照阿肽地爾主鏈肽序依次偶聯(lián)具有N端Fmoc保護(hù)且側(cè)鏈保護(hù)的氨基酸，其中23、24位和27、28位氨基酸偶聯(lián)采用二肽片段Fmoc-Leu-Asn-OH偶聯(lián)，而第1位組氨酸偶聯(lián)采用Boc-His(Trt)-OH；最后肽樹(shù)脂裂解，純化，凍干后得到阿肽地爾。

本發(fā)明中一些常用的縮寫(xiě)具有以下含義；

Fmoc ：芴甲氧羰基

Fmoc-AA ：芴甲氧羰基保護(hù)的氨基酸

DIC ：N，N′-二異丙基碳化二亞胺

PyBOP ：六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷

HATU ：2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯

HOBt ：1-羥基苯駢三唑

tBu ：叔丁基

Trt ：三苯甲基

Boc ：叔丁氧羰基

Pbf ：2,2,4,6,7-五甲基二氫苯并呋喃-5-磺酰基

Ile ：異亮氨酸

Ser ：絲氨酸

Tyr ：酪氨酸

Lys ：賴氨酸

Val ：纈氨酸

Ala ：丙氨酸

Met ：甲硫氨酸

Gln ：谷氨酰胺

Arg ：精氨酸

Leu ：亮氨酸

Thr ：蘇氨酸

Asn ：天冬酰胺

Asp ：天冬氨酸

Phe ：苯丙氨酸

His ：組氨酸

DMF ：N,N′-二甲基甲酰胺

MeOH ：甲醇

DCM ：二氯甲烷

TFE ：三氟乙醇

NMP ：N-甲基吡咯烷酮

DMSO ：二甲基亞砜

TFA ：三氟醋酸

PhSMe ：苯甲硫醚

EDT ：1,2-乙二硫醇

Piperidine ：六氫吡啶

為此本發(fā)明提供一種制備阿肽地爾的方法，其步驟如下：

步驟1，通過(guò)液相法合成二肽片段Fmoc-Leu-Asn-OH；

步驟2，采用固相合成法，以Rink Amide MBHA氨基樹(shù)脂為起始樹(shù)脂，按照阿肽地爾主鏈肽序依次偶聯(lián)具有N端Fmoc保護(hù)且側(cè)鏈保護(hù)的氨基酸，其中23、24位和27、28位氨基酸偶聯(lián)采用二肽片段Fmoc-Leu-Asn-OH偶聯(lián)，而第1位氨基酸采用Boc-His(Trt)-OH；

步驟3，肽樹(shù)脂裂解，純化，凍干后得到阿肽地爾。