[發明專利]一種靶向PRC2抗腫瘤藥物的篩選方法

有效

• 申請號: 201410643454.0
• 申請日: 2014-11-07
• 公開（公告）號: CN104374904A
• 公開（公告）日: 2015-02-25
• 發明（設計）人: 黃文林;陳慧明;陳帥
• 申請（專利權）人: 中國科學院微生物研究所
• 主分類號: G01N33/50
• 分類號: G01N33/50;G01N21/31
• 代理公司: 北京東方匯眾知識產權代理事務所(普通合伙) 11296
• 代理人: 張淑賢;毛軍

技術領域

本發明涉及一種抗PRC2依賴性腫瘤藥物的篩選方法，所述方法以EED-EZH2相互作用為靶點，通過初篩和復篩，篩選出對EED-EZH2互作有拮抗并能使PRC2復合物組分有降解作用的小分子化合物，該小分子化合物可抑制PRC2復合物活性，降解EZH2，對PRC2依賴性的腫瘤細胞有殺傷作用，可用作抗腫瘤藥物。

發明背景

癌癥由多種因素引起，在世界范圍內，它是第一致死因素。2008年統計的數據顯示，大概有七百六十萬人死于癌癥(占所有死亡人數的13％)。急需新的，更有效的癌癥療法來改善這種狀況。長期以來，表觀遺傳和基因突變被認為是癌癥發生過程的兩種不同機制。通過基因途徑致癌相對比較直接：抑癌基因的突變和/或致癌基因引起的功能獲得型突變或功能喪失型突變，及異常表達。通過表觀遺傳途徑致癌相對來說沒那么簡單。它取決于染色質結構包括DNA甲基化，組蛋白變體和修飾，核小體重塑和一些小的非編碼調節RNAs(Sharma?et?al.,2010)。在癌癥的發生和發展中，表觀基因組經歷了很多改變，包括基因組范圍DNA去甲基化(超甲基化)，CpG島啟動子甲基化程度增高，核小體空間結構改變及修飾。

進年來，對表觀遺傳失調在癌癥中的作用的認識有所增強。由此，也給靶向性癌癥療法帶來了新的機遇。表觀遺傳學主要是研究基因DNA序列不變的轉錄的可遺傳變化。該領域的研究，也讓我們發現了些選擇性激活或抑制靶基因的藥物。所以，表觀遺傳學也成為了一門發展很迅速的學科。雖然，我們對表觀遺傳學的認識還相對比較膚淺。但是，近來，我們也發現一些表觀遺傳調控因子，包括DNA甲基化，組蛋白修飾，染色質重塑和基因轉錄，在癌癥的引起和發展中所起的作用。大量研究表明，異常的翻譯后調控-組蛋白修飾，在很多疾病的發生和發展中有著重要作用。

科學家和藥學界近來開發高效、特異的染色質相關蛋白抑制劑取得很大進步。而這些抑制劑主要靶向：組蛋白甲基轉移酶、組蛋白去甲基酶、乙酰賴氨酸結合域。目前，大量的研究集中在靶向組蛋白甲基轉移酶。

在癌癥領域，在一些不同的腫瘤類型中發現的一些組蛋白甲基轉移酶基因改變無疑引起了很多關注，也支撐了疾病中廣泛被認為由基因驅動的表觀遺傳的失調的重要性。一些例子(像后面要討論的甲基轉移酶EZH2)，它的催化結構域，SET結構域的雜合子點突變導致相對野生型的功能獲得性突變。使其更傾向于超甲基化，并且沉默抑癌基因和/或特異的分化相關基因。同樣的，在其它腫瘤中(比方說，多發性骨髓瘤中NSD2的高表達)，染色體移位導致甲基轉移酶的高表達，也導致異常的轉錄和擴增。相反地，由組蛋白甲基轉移酶DOT1L引起的賴氨酸甲基化卻使得白血病生成所需的多種基因持續的表達。因此，對于像EZH2或DOT1L的小分子抑制劑應該能減少或消除組蛋白甲基轉移酶對特異位點賴氨酸的甲基化，并且逆轉它的致癌性。現今，研究的比較多的抑制劑主要是針對EZH2。

EZH2(Enhancer?of?zeste?homolog?2)是一種組蛋白甲基轉移酶，它催化甲基從輔因子S腺苷甲硫氨酸轉移到組蛋白H3的27位賴氨酸上，使得組蛋白H3的27位賴氨酸三甲基化。一些研究表明在一些實體瘤中，包括前列腺癌、乳腺癌、腎癌和肺癌。EZH2水平會升高并且使其靶基因沉默，從而導致預后差。